- 生化试剂
- ELISA检测
-
抗体蛋白
二抗生物素标记 过氧化物酶(HRP)标记 胶体金试剂 FITC荧光标记 RBITC荧光标记 二抗免疫血清 其它荧光标记二抗 藻红蛋白(PE)荧光标记 胶体金(Gold)标记 SAlexa Fluor荧光系列 碱性磷酸酶(AP)标记 别藻蓝蛋白(APC)荧光标记 其它标记 PE标记二抗 DyLight标记二抗 AU标记二抗 Biotin标记二抗 AMCA标记二抗 Texas Red标记二抗 TRITC标记二抗 HRP标记二抗 未标记二抗 Cy标记二抗 AbBox Fluor标记二抗内参抗体 小分子抗体抗体标记试剂盒细菌抗体蛋白病毒包装试剂杂交瘤融合筛选WB、IHC、ELISA相关试剂细胞培养试剂病原微生物抗原抗体假病毒抗体校准品其他抗原抗体标记的标签抗体病理级IHC抗体重组蛋白
- 细胞培养
- 实验耗材
- 仪器设备
- 生化试剂盒
- 小分子试剂
- 基质胶
-
斑马鱼产品
订货时间：周一至周五
订货Q Q：79688691
订货邮件：79688691@qq.com
产品简介在细胞培养过程中，由于培养条件、操作方式的不合适等原因可能会引起部分的细胞发生凋亡，进而影响实验的效果及稳定性，通过本试剂盒中的死细胞清除剂和死细胞清除磁珠可标记发生凋亡的细胞，通过磁性分选可去除细胞培养或组织制备中的凋亡细胞，具有不依靠分选柱，操作简单的特点，在本试剂盒处理后可大大降低细胞中凋亡细胞的比例，从而改善细胞培养的效果。
产品组成成分| 产品名称 | 产品规格 | 储存条件 |
| 死细胞清除剂 | 100μL(50T) | 2-8°C,6个月 |
| 死细胞清除磁珠 | 1000μL(50T) | 2-8°C,6个月 |
| 死细胞结合缓冲液（5×） | 50mL(50T） | 2-8°C,6个月 |
清除步骤(仅供参考)1.计数，取1×107个在培养过程中或人为诱导的发生了凋亡的细胞，将细胞悬液在离心机中以300g，离心5min，去除上清（贴壁细胞可通过吹打或用不含EDTA的胰酶消化的方式使细胞脱落，将细胞悬液在离心机中以300g，离心5min，去除上清），加入500μL的1×死细胞结合缓冲液重悬细胞。
2.再次在离心机中以300g，离心5min，去除上清。
3.将细胞以100μl的1×死细胞结合缓冲液重悬（分选少于1×107个细胞均采用100μl的1×死细胞结合缓冲液重悬，死细胞清除剂和磁珠用量与分选1×107个细胞相同，多于1×107个细胞如2×107个细胞则需要采用200μl的1×死细胞结合缓冲液重悬，死细胞清除剂和磁珠用量也需加倍），加入2ul死细胞清除剂，4°C孵育15min。
4. 吸取20μl 死细胞清除磁珠（吸取前涡旋振荡重悬磁珠，确保磁珠完全重悬，加入1mL 的1×死细胞结合缓冲液重悬清洗磁珠，1000g离心5min，或在磁力架的磁场中吸附磁珠，弃去上清，加入20μL的1×死细胞结合缓冲液重悬）。
5.抗体孵育完成后，加入1ml的1×死细胞结合缓冲液重悬，在离心机中以300g，离心5min，去除上清，将细胞以100μl的1×死细胞结合缓冲液重悬，在重悬的细胞中加入清洗过的死细胞清除磁珠，混匀后4°C孵育15min，期间可每隔5min轻吹打细胞和磁珠混合均匀（本方案为去除1×107个细胞中凋亡细胞的方案，在操作过程中由于分选细胞的类型以及细胞损伤的程度不同，需根据细胞状态调整试剂的用量，根据所分选的细胞类型不同，本试剂中20μl磁珠可吸附约5-15×106个凋亡细胞）。
6.孵育完成后，加入2ml的1×死细胞结合缓冲液重悬重悬。
7.将重悬好的细胞置于磁力架中，吸附3-5min，待凋亡细胞被吸附完全后，可吸取未被磁场吸附的细胞即为去除凋亡细胞后的目的细胞。
8.将分选后的细胞悬液在离心机中以300g，离心5min，去除上清，使用完全培养基重悬，可用于继续培养。
分选效果对使用本试剂盒清除前后的凋亡细胞进行流式细胞分析检测显示，分选后的Annexin V+和PI+细胞的比例大大降低。
本试剂盒分选前后悬浮细胞THP-1的Annexin V+和PI+细胞的流式细胞仪检测结果：
本试剂盒分选前后贴壁细胞T24的Annexin V+和PI+细胞的流式细胞仪
注意事项1.磁珠和抗体混合液使用和保存过程中均应避免冷冻、高速离心等操作。
2.操作过程应在无菌环境下进行，必须保证操作过程中使用的所有容器及所有直接接触细胞液的器具严格无菌。
3.本产品需要与磁力架配套使用。
4.我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
5.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
6.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
7.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
