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植物核DNA微量提取试剂盒  Cite:0    分享

货号: F13742
复制产品信息
规格:
50T
单位:
单价:¥550.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤(仅供参考)
注意事项
基本信息
  • 产品名称
    植物核DNA微量提取试剂盒
  • 保存温度
    按试剂盒各组分温度保存
  • 有效期
    6个月
产品简介

从植物组织中制备基因组 DNA 较常采用的方法有氯化离心法、CTAB 抽提法等,CTAB抽提法是经典且迅速的植物 DNA 提取法,可以用于多种不同类型植物样品中DNA的提取,获得的量很高但纯度一般,但是足够用于大多数分子生物学实验。
本品植物核DNA微量提取试剂盒是简单快速简便的提取植物核中DNA的试剂盒,先将新鲜植物样本研磨破碎细胞壁,采用差速离心法分离出细胞核并将其裂解,再用有机溶剂沉淀并去除核蛋白质,无水乙醇抽提出核 DNA。本法操作情况下,0.5g 新鲜叶片可得5~15μg 核 DNA,纯度较高,可用于基因分子操作(限制酶酶切等)及扩增(PCR、RAPD)等。该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成
组分50T100T保存温度
试剂(A): 核提取缓冲液100ml0.05ml2-8℃ 避光
试剂(B): 核裂解液50ml100ml2-8℃
试剂(C): 蛋白沉淀剂50ml100ml室温 避光
试剂(D): 柠檬酸缓冲液25ml50ml2-8℃
试剂(E): TE Buffer5ml10ml室温
试剂(F): RNase A(10mg/ml)0.05ml0.1ml-20℃ 避光


操作步骤(仅供参考)

自备材料
1. 电子天平、滤纸、剪刀、液氮、研钵或匀浆器
2. 离心机、离心管、冰箱、恒温箱或水浴锅
3. 蒸馏水、无水乙醇、70%乙醇
操作步骤(仅供参考)
(一)样品处理及分离细胞核
1. 称取 0.2~0.3g 新鲜幼叶样本等,用蒸馏水清洗干净,滤纸吸干水分,剪成碎片,置于匀浆器中,然后加入 1ml 核提取缓冲液,匀浆 1min。
2. 匀浆液转移至离心管,用 1ml 核提取缓冲液清洗匀浆器,并转入离心管中。
3. 室温下相对离心力 70g 离心 10min,转移上清液至新的离心管中,弃去组织碎片沉淀上清液再用相对离心力 750g 离心 15min,去上清,保留细胞核沉淀。
(二)细胞核裂解及核DNA提取
1. 向细胞核沉淀中加入 1ml 核裂解液,悬浮沉淀,60℃水浴 30min。
2. 加入 0.9ml 蛋白沉淀剂,温和颠倒离心管并混匀,4℃下相对离心力8500g 离心15min,转移上清液于新的离心管中。
3. 向上清中加入 0.5ml 的柠檬酸缓冲液和 2ml 的无水乙醇,混匀,-20℃静置30min。
4. 4℃下相对离心力 8500g 离心 15min,去除上清液。
5. 加入 1ml70%乙醇洗涤沉淀,温箱吹干,即得核 DNA 沉淀。
(三)核DNA纯化
1. 向上述核 DNA 沉淀中加入 50~80μl TE Buffer 和 0.8μl RNase A(10mg/ml),并充分溶解混匀,37℃保温 1h。
2. 再加入 80μl 蛋白沉淀剂,温和颠倒离心管并混匀,室温下 10000r/min 离心10min,转移上层溶液于新的离心管中。
3. 向上层溶液中加入 2 倍体积的无水乙醇重新沉淀,即得经纯化的核DNA。
4. 经纯化的核 DNA 溶解于 10μl TE Buffer 中。

注意事项

1. 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2. 用于裂解植物组织或叶片越新鲜,裂解效果越好、收获量越大。
3. 加入柠檬酸缓冲液,使提取液 pH 下降,防止核裂解液中的有效成分被乙醇沉淀。

4. 提取过程中的机械力可使大分子 DNA 断裂,因此各步操作均应温和,避免剧烈震荡。
5. 使用到的器皿、离心管最好经过硅化处理。

6. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

8. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

9. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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