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NaOH-SDS溶液  Cite:0    分享 一键复制产品信息

货号: F11431
规格:
2X100ml 2X500ml
单位:
单价:¥230.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤(仅供参考)
注意事项
基本信息
  • 中文名称
    NaOH-SDS溶液
  • 保存温度
    室温
  • 有效期
    1年
  • 应用
    碱裂解溶液,碱裂解法小量制备质粒DNA,临用前1:1混合使用
产品简介

碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法,可用于抽提微克级别的质粒DNA,葡萄糖-Tris-EDTA 溶液(GTE)、NaOH/SDS 溶液和乙酸钾溶液(5mol/L,pH4.8)是其常用试剂。NaOH-SDS溶液由NaOH溶液和SDS溶液等组成,临用前等量混合使用,溶液呈碱性,是碱裂解法提DNA的重要成分,其原理是当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,加入中和液(乙酸钾溶液)后,质粒DNA分子迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中,由于蛋白质和染色体DNA不复性而呈絮状,离心时可沉淀下来。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

产品组成
名称2x100ml2x500ml保存
试剂(A): NaOH 溶液100ml500ml室温
试剂(B): SDS 溶液100ml500ml室温


操作步骤(仅供参考)

1. 配制 NaOH-SDS 溶液:取NaOH溶液和SDS溶液等比例混合后使用,宜临用前配制。
2. 接种1个单菌落于LB培养基中,37℃培养至饱和状态。
3. 取1.5ml培养液,10000~12000g 离心 20~60s,弃上清。
4. 用100μl 葡萄糖-Tris-EDTA 溶液彻底重悬沉淀,室温静置 5min。
5. 加入200μl新鲜配置的NaOH-SDS溶液,颠倒混匀数次,可在冰上放置2~5min,使细胞膜破裂。

6. 加入150μl乙酸钾溶液,将管温和颠倒数次混匀,见白色絮状沉淀,可在冰上放置3~5min,此时质量DNA复性,染色体和蛋白质不可逆变性,形成不可溶复合物。

7. 加入150μl酚氯仿异戊醇,震荡混匀,4℃12000r/min 离心 10min,继续后续实验。

注意事项

1. NaOH 溶液呈强碱性,请小心操作,如果皮肤接触,应尽快擦干并用流水充分冲洗。

2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

3. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

4. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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