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产品名称DNA末端平滑试剂盒
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保存温度-20℃
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有效期1年

DNA末端平滑试剂盒(DNA Blunting Kit)是利用T4 DNA聚合酶(T4 DNA Polymerase)的5'→3' DNA聚合酶活性和3'→5'的DNA外切酶活性,用于将酶切或PCR等反应后产生的粘末端转变为平末端的试剂盒。经过本试剂盒处理产生的平末端DNA片段可以用于常规的平端连接反应。粘末端有两种,一种为5'端突出末端,另外一种为3'端突出末端。本试剂盒可以将5'端突出末端补平,也可以将3'端突出末端削平(也称打平)。 当末端为5'端突出末端时,T4 DNA Polymerase可以利用其5'→3' DNA聚合酶活性将末端补平;当末端为3'端突出末端时,T4 DNA Polymerase可以利用其3'→5' DNA外切酶活性将末端削平。
Reaction Buffer (5X):335mM Tris-HCl (pH8.8 at 25ºC),33mM MgCl2,5mM DTT, 84mM (NH4)2SO4。
本试剂盒可以进行20个常规的末端平滑化反应。

组分 | 规格 |
试剂A:T4 DNA Polymerase (1U/µl) | 20µl |
试剂B:Reaction Buffer (5X) | 100µl |
试剂C:dNTP Mixture (2.5mM each) | 50µl |

1. 参考如下表格设置反应体系:
Reaction Buffer (5X) | 4µl |
dNTP Mixture (2.5mM each) | 0.8µl |
DNA | 1µg |
补充无核酸酶的去离子水 | 至19µl |
T4 DNA Polymerase (1U/µl) | 1µl |
2. 按上述体系配好之后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex 在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
3. 11ºC 孵育 20 分钟,或室温(20-25ºC)孵育 5 分钟。
4. 70ºC孵育10分钟终止反应。随后可直接用于连接反应或纯化后用于连接反应。如果不直接用于后续反应,可以在-20ºC保存。

1. 使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。
2. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
3. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
4. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
5. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。