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Annexin V-APC/PI细胞凋亡检测试剂盒  Cite:0    分享
Annexin V-APC/PI Apoptosis Kit

货号: SQ1110
复制产品信息
规格:
20Aaaays 50Aaaays 100Aaaays 200Aaaays
单位:
单价:¥1500.00
产品简介
产品组成
操作步骤(仅供参考)
储存与保存
注意事项
产品简介
  • 产品名称
    Annexin V-APC / PI细胞凋亡检测试剂盒
  • 英文名称
    Annexin V-APC/PI Apoptosis Kit
  • 检测原理
    Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记荧光染料,利用流式细胞仪检测细胞凋亡。 细胞核染料(PI,DAPI,7-AAD)可与双链DNA特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,细胞核染料(DAPI、PI、7-AAD)可进入细胞内对DNA进行染色,与Annexin V搭配使用,可区分处于不同凋亡时期的细胞。
  • 检测方法
    荧光法;流式
  • 样本类型
    细胞
  • 检测时间
    40min
  • 检测仪器
    流式细胞仪
  • 荧光
    APC
  • Ex/Em
    650/660
  • Channel set
    APC
  • 自备试剂
    PBS(E-BC-R187), 去离子水
  • 运输条件
    冰袋
产品组成
产品名称20Assays50Assays100Assays200AssaysStorage
Annexin V-APC Reagent100μL250μL250μL1mL2~8℃, 避光
Annexin V-APC Reagent1.4mL×25.5mL11mL11mL×22~8℃
PI Reagent (50μg/mL)100μL250μL500μL1mL2~8℃,避光
说明书说明书1份


操作步骤(仅供参考)

一步法
1.细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300×g离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤一次,轻轻重悬细胞并计数。
2.取 1~10 × 105重悬的细胞,300×g 离心5min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,离心后弃上清,加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer重悬细胞。
3.细胞悬液中加入5μL的 Annexin V-APC Reagent 和5μL的PI Reagent (50μg/mL)。
4.轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育15~20 min。
5.立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。
注:流式细胞仪检测时 Annexin V-APC 可用APC通道,PI优先选择ECD通道,其次是PE通道;如果样本有FITC通道的自发荧光,则选择PerCP/Cy5.5 通道。

两步法
1.细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300×g离心5min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤一次,轻轻重悬细胞并计数。
2.取 1~10×105重悬的细胞,300×g离心5min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,离心后弃上清,加入100μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer重悬细胞。
3.细胞悬液中加入2.5μL的Annexin V-APC Reagent和2.5μL 的PI Reagent (50μg/mL)。(由于两步法分辨率更高,染色液用量减半依然可得到媲美一步法的效果;用户亦可根据自己的模型进行滴定后加入适量的染色液,用更少的量获得高质量的结果。)
4.轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育15~20min。
5.加入400μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer,混匀样本。
6.立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。
注:流式细胞仪检测时 Annexin V-APC可用APC通道,PI优先选择ECD通道,其次是PE通道;如果样本有FITC通道的自发荧光,则选择PerCP/Cy5.5通道。

储存与保存

1.保存:2~8℃,避光保存
2.有效期:1年

注意事项

1.我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。

2.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。 

3.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 

4.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。 

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级,请以实际收货标签信息为准。

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