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Q1.如何选择适合的血清？
1）考虑血清来源：胎牛血清的营养成分最为丰富，其次分别是新生牛血清、小牛血清、成年牛血清。优级胎牛血清适合养重要细胞和部分原代细胞。
2）考虑血清质量指标：低内毒素、低杂质、丰富的营养成分和生长因子的血清有助于减少实验误差。
3）考虑批次一致性：同批次血清的效果更加稳定，建议购买足量。
4）考虑品牌与口碑：选择经过市场验证且口碑良好的品牌，如萨默斯 Summus。
5）考虑价格与性价比：确保在预算内选择高性价比产品。
Q2.血清里有絮状物是什么原因？
冷冻或解冻不当：反复冻融可能导致蛋白沉淀和其他物质沉淀。
保存环境不稳定：血清应冷冻保存（-20°C），避免长时间暴露在室温下，避免紫外线直接照射。
产品本身问题：部分血清中蛋白质含量较高，易形成沉淀，但通常不会影响使用效果。
解决办法：
使用前摇匀或过滤，确保均匀性。
避免反复冻融，建议分装保存，按需溶解，且2-8℃溶解。
Q3.显微镜下看到的细胞有黑点是什么？
细胞碎片：细胞老化或死亡导致的碎片残留。
污染：细菌、真菌或支原体污染也会导致培养液变浑浊。
容器脏污：培养容器如果清洗不彻底，可能会残留一些小颗粒杂质，或者在清洗过程中洗涤剂没有冲洗干净，残留的洗涤剂颗粒在显微镜下也可能表现为黑点。
试剂杂质沉淀：血清及培养基等试剂中沉淀和杂质也会以小黑点形式呈现。
解决办法：
定期更换培养基、检查无菌操作。
观察污染程度，必要时弃掉培养物重新开始。
Q4.如何正确复苏细胞？
快速解冻：将冻存管从液氮中取出，立即放入37°C水浴中快速解冻（1-2分钟）。
无菌操作：解冻后立即转移至培养瓶，加入适量预热培养基。
离心分离：低速离心（约1000rpm），去除冷冻保护剂，避免对细胞有毒副作用。
重新培养：将细胞重新接种至培养瓶，置于适合的培养条件（如37°C、5% CO₂）中。
定期观察：注意细胞贴壁和生长情况，及时检查是否污染和更换培养基。
Q5.如何判断细胞是否被污染？
细胞形态异常，如贴壁细胞大量脱落、细胞形态变圆、生长缓慢、代谢异常等。
培养基浑浊或变色，如培养基由红变黄、表面形成一层膜状物、显微镜下可见移动的颗粒或丝状物等。
荧光染色检测异常，如某些荧光染料可以特异性地结合细菌的细胞壁或真菌的细胞膜，使它们在荧光显微镜下呈现出特定的颜色，便于观察和判断是否存在污染。
处理办法：发现污染需立即废弃污染培养物，并对培养环境进行彻底消毒。
Q6.血清可以替代培养基吗？
血清是细胞培养基中非常重要的一种补充成分，但是不能完全替代培养基，因为它缺乏基本营养物质的精确供应以及合适的物理化学环境。
Q7.血清需要灭活处理吗？
血清是否需要灭活要综合考虑实验目的、细胞类型、检测方法等多种因素。
如果进行常规的细胞培养是不需要灭活血清的，毕竟血清灭活过程可能会导致血清中一些营养成分（如氨基酸、维生素等）的损失，还可能产生沉淀，影响血清的质量；如果进行某些特殊的实验，如培养对补体非常敏感的细胞，血清中的补体可能会干扰实验结果，这种情况下就需要对血清进行灭活处理，以去除补体活性。
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