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产品简介PVDF 膜是由聚偏氟乙烯（PVDF）制成的一种多孔膜，通常用于生物科技和化学分离和纯化过程中的过滤应用。其 中 PVDF 转印膜是一种用于蛋白质转印的膜，可以用于将凝胶上分离的蛋白质转移到 PVDF 膜，然后使用特定的抗体进行 蛋白质免疫印迹（Western blotting）分析。此外 PVDF 转印膜还可用于质谱分析和其他分析技术中的蛋白质分析。 在使用时需要注意适当的条件和操作步骤，以确保膜的质量和性能。PVDF 转印膜使用前通常使用甲醇、酸或酶等化 学物质进行激活激活，以增加其与蛋白质的结合能力。在进行转印之前，需要将膜切割为适当的大小和形状，并将其与凝 胶和电泳缓冲液进行组装。通过适当的转印条件（电流、电压和时间等），有时需要根据不同的应用和蛋白样品来进行调 整优化。
操作过程-
介绍经过多年不断的研发和优化，伊事达品牌 PVDF 转印膜产品于 2022 年上市，无论内部研发数据，还是外部科研人员 试用反馈，Western blot 的使用效果均可以媲美甚至优于进口品牌，与您常规转印方式相同。 经比较伊事达品牌 PVDF 膜对蛋白的结合能力更强，因此与您原来的操作过程相比，蛋白转印时间、一抗孵育时间、 二抗孵育时间和曝光时间等过程可适当缩短，缩短您的实验时间。
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样品将待测样品进行处理（细胞裂解和组织匀浆等）获取蛋白质样品。可直接进行后面电泳操作， 或将样品置于负 80 或负 20 度冰箱保存。
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电泳根据检测目的蛋白大小配制适合浓度的 SDS-PAGE 胶，最常用 10%的胶浓度，能够较好分离 15KD~135KD 的蛋白，如果蛋白较大，可缩小胶浓度，蛋白较小，可增加胶浓度。
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转印将电泳分离后的蛋白质转移到 PVDF 膜。通常使用湿式转移电泳法，按照“负极-海绵-滤纸-蛋 白胶-PVDF 膜-滤纸-海绵-正极”的顺序组装，整个操作建议浸润在转印液中进行，减少引入气泡。转 印槽至于冰水浴中或 4 度冰箱中，防止温度过高影响转印效果。
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封闭将 PVDF 膜在 5%的脱脂奶粉或 3%的 BSA 等进行封闭，避免非特异性结合，减少背景信号， 室温孵育 1h。
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一抗孵育新鲜配置或重复使用均可，在室温孵育 1~2h，或 4 度孵育过夜，使抗体与待检测蛋白质 结合。
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洗涤缓冲液洗涤膜上非特异性结合的抗体和蛋白质，降低背景信号。
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二抗孵育加入与一抗来源不同的二抗，与一抗结合。二抗通常标记有酶或荧光基团，用于后续检测。
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洗涤缓冲液洗涤膜上非特异性结合的二抗，降低背景信号。
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检测（曝光）常用酶联检测（例如与二抗结合的 HRP 或 AP），底物有显色、化学发光和化学荧光 三种类型，也可使用与二抗直接结合的荧光基团检测。（伊事达 PVDF 膜可用于所有常见检测方式）
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图像获取通过专业的成像仪器如激光扫描仪、CCD 相机等获取膜上信号，并进行定量分析。
使用事项操作时应注意无菌条件， 避免污染。
可通过丽春红染色观察 PVDF 膜转印情况，不影响后续免疫检测。
一抗和二抗的浓度可根据不同应用场景和初次实验结果优化。
洗涤过程需要充分，否则会增加背景。
显示染色需根据实验需要进行优。
注意事项1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
结果展示
