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IMM-Quick Hela细胞专用转染试剂  Cite:0    分享

货号： IM1087
复制产品信息
  • 用途：专用于Hela细胞，可立传立转
规格:
0.8ml
单位:
瓶
单价:￥1050.00
基本信息
产品简介
操作步骤（仅供参考）
注意事项
基本信息
  • 产品名称
    IMM-Quick Hela细胞专用转染试剂
  • 保存温度
    2-8℃
  • 有效期
    1年
  • 应用
    用于 Hela 细胞的瞬时转染和稳定细胞系构建（立传立转）
产品简介

IMM-Quick系列转染试剂是一类具有自主知识产权、独特配方的阳离子型转染试剂，具有高效、低毒和易于使用等优点，推荐用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。IMM-Quick区别于常规转染试剂的两个最主要特点是：（1）可以在贴壁细胞传代后尚未贴壁时立即进行转染（立传立转）；（2）转染操作可在一分钟内完成。

重要提示
1. 与常规转染试剂不同，使用IMM-Quick可在贴壁细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染（立传立转），从而可节省 18~24 小时的转染前细胞培养时间。
2. IMM-Quick极大简化了转染操作，转染试剂和质粒混合后无需室温静置孵育，可直接加入含血清的细胞培养基中进行转染，而且无需在转染后补加血清或更换培养基，整个转染操作可在一分钟内完成。
3. 立传立转、一分钟完成转染操作和高转染效率等优点使得部分使用IMM-Quick的转染实验可在细胞传代后 24 小时内完成，从而比常规转染试剂节约 24~48 小时。
4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐一次（即每孔）转染的低内毒素质粒DNA 用量为1~2µg、转染试剂用量为 3~5µl（请在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告基因进行优化），质粒和转染试剂可用无菌生理盐水稀释。
5. IMM-Quick经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，虽然在实验中推荐使用DMEM，但有实验结果表明 M199 能够显著增强IMMblot对 Vero 细胞和 293FT 细胞的转染效果，因此可尝试使用不同培养基对转染条件进行优化。
6. IMM-Quick设计用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建，不推荐但可尝试用于哺乳动物原代细胞和二倍体细胞的转染。
7. IMM-Quick转染试剂建议常温运输，2~8ºC 保存（在-30 ºC 到室温范围内均可长时间稳定保存），无菌取用，有效期12个月。

附表 1 IMM-Quick用量一览表（仅供参考，建议优化）

培养器皿表面积(cm2)培养基用量(ml)DNA 用量(μg)/生理盐水用量(μl)转染试剂用量(μl)/生理盐水用量(μl)
96 孔板0.40.2 0.4/250.8/25
24 孔板212/504/50
12 孔板424/50 8/50
6 孔板936/10012/100
35mm 培养皿936/10012/100
60mm 培养皿21612/20024/200
100mm 培养皿551530/40060/400
25cm2培养瓶25714/20028/200
75cm2培养瓶752040/40080/400
175cm2培养瓶17550100/1000200/1000


操作步骤（仅供参考）

1. 将新鲜消化的 Hela 细胞接种到 24 孔细胞板中，每孔 1~2×105细胞，1ml 完全培养基。
备注：可在生长旺盛的细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染，无需 18~24 小时的等候时间。
2. 将 1~2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染试剂分别稀释到 50μl 生理盐水中。
备注：质粒DNA和转染试剂的最适用量需要根据不同培养基来优化，但理论上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范围。
3. 合并上述两溶液并混匀。
备注：无需其它转染试剂所需的 10~30 分钟的等候时间。
4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中，用加样器吸打混匀。
备注：转染复合物可直接加入含血清的细胞培养基中进行转染。
5. 将细胞板移至 37ºC/5% CO2孵箱中进行培养。
备注：无需在转染后 4~6 小时补加血清或更换培养基。
6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。

注意事项

1. 质粒 DNA：请用能够去除内毒素的方法制备高质量的质粒 DNA。
2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒素纯水配制，高压消毒或除菌过滤。
3. 培养基：经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，推荐使用含5~10%牛血清的DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。
4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒素质粒 DNA 用量为 1~2µg、转染试剂用量为3~5µl，请在正式实验前根据不同培养基用报告基因进行优化。
5. 立传立转要求使用生长旺盛的细胞，即细胞生长至 80-90%成片或刚长满。若使用生长过老的细胞，将明显影响立传立转的效率。
6. 立传立转对细胞状态要求较高，如果转染效果不理想，可按增强型转染试剂的转染方法（IM10279），在细胞贴壁后进行标准转染操作。

7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

8. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

9. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。 


备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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