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PEI-293贴壁细胞转染试剂  Cite:0    分享

货号： IM1088
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  • 用途：用于贴壁生长的 293 系列细胞（如 HEK293、HEK293T、HEK293A、293FT 等）的转染
规格:
1ml
单位:
瓶
单价:￥750.00
基本信息
产品简介
操作步骤（仅供参考）
注意事项
基本信息
  • 产品名称
    PEI-293贴壁细胞转染试剂
  • 保存条件
    -20℃，有效期2年(解冻后2-8℃有效期6个月) ，勿反复冻融
  • 应用
    用于贴壁生长的 293 系列细胞（如 HEK293、HEK293T、HEK293A、293FT 等）的转染
产品简介

PEI-293 贴壁细胞转染试剂是一种化合物转染试剂，不含动物源性成分，是一种功能强大的转染试剂，为贴壁细胞提供高效且可重复的基因递送方案。在 293 细胞表达系统中，PEI-293 贴壁细胞转染试剂在大范围内提供均一的高基因表达（96 孔板至 100L 生物反应器）。特别适用于自动预制或手动 HTS（高通量筛选）转化方案，可用于抗体表达，各种病毒包装如 AAV，慢病毒，腺病毒，及重组蛋白的试剂。本产品经 0.22µm 滤膜过滤除菌。注意无菌取用。

操作步骤（仅供参考）

贴壁细胞转染使用方法（以 6 孔板为例）:
1. 接种细胞：为了提高转染效率，建议转染前 24 小时接种细胞到 6 孔细胞板中，每孔 5~10×105细胞，3ml完全培养基，转染时细胞密度在 70%~80%为宜。
2. 准备 DNA-PEI 复合物：按照以下体系配制 DNA-PEI 核酸-转染试剂复合物：
1）对于每孔细胞，使用 100 μL 无血清稀释液（如 DMEM 等) 稀释 2 μg 目的 DNA，充分混匀成 DNA稀释液。
【注】无血清稀释液建议采用 Opti-MEM、DMEM 或 ddH2O，使用 Opti-MEM 更佳。
2）立刻向 100 μL 的 DNA 稀释液中加入 6 μL 的PEI-293 贴壁细胞转染试剂，轻轻混匀。DNA：PEI（质量体积比， µg:µl) 比例可以按需调整
3）在室温下孵育 10~15 min，形成 DNA-阳离子核酸转染试剂复合物。
3. 转染细胞：
1）在形成复合物过程中，移除细胞生长培养基，每孔中加入 2 mL 新鲜预热的完全培养基。
2）将全部 DNA-PEI 复合物加入到细胞中，摇动培养板，轻轻混匀。
3）37 ℃，5% CO2 培养箱培养，转染后最快 24 h 即可检测到转染基因的表达(转染后 24 小时进行一次换液，后续根据细胞类型和细胞密度，2-3 天换液)。请自行确定适合检测时间。
4. 稳转筛选（可选）转染 24 h 后，将细胞传代至新鲜的生长培养基中（将细胞稀释 10 倍以上），37 ℃，5% CO2 培养箱孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约 1~2 周可筛选到耐药性克隆，在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。

附表 1 PEI 用量一览表（以 DNA:PEI 比例 1:3 为例，仅供参考，建议优化）

培养器皿表面积(cm2)培养基用量(ml)DNA 用量(μg)/DMEM(μl)转染试剂用量(μl)/DMEM(μl) 用量(μl)
96 孔板 0.40.20.1/25 0.3/25
24 孔板 210.5/501.5/50
12 孔板421/503/50
6 孔板 932/100 6/100
35mm 培养皿932/100 6/100
60mm 培养皿2164/20012/200
100mm 培养皿551512/400 36/400
25cm2培养瓶 2576/200 7.5/200
75cm2培养瓶752018/400 54/400
175cm2培养瓶 1755040/1000120/1000


注意事项

1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

3. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。 


备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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