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基本信息-
产品名称高效蛋白转染试剂
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保存温度-20℃
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有效期1年
产品简介高效蛋白转染试剂是一种新型的阳离子脂质体转染试剂，可用于将功能性蛋白高效地输送到真核细胞内。该转染试剂能够与蛋白形成带正电荷的非共价复合物，细胞膜表面带负电荷，能够将该复合体吸附，被吸附后的复合体能够通过膜融合作用或者细胞内吞的方式形成包涵体进入细胞，并释放到细胞质中进行解离。整个输送过程低毒，并可有效地传递功能性蛋白。
产品用途：（1）胞内蛋白质递送研究；（2）递送基因编辑 Cas9 蛋白质复合物
操作步骤（仅供参考）(以 24 孔板单孔用量为例)
1. 细胞准备：在 24 孔板中加入 1ⅹ105细胞/孔，孵育过夜。
2. 转染试剂工作液准备：计算所需用量，用 HEPES 缓冲液（25mM，pH7.4）将转染试剂母液稀释至1mg/ml。
备注：为确保重复性良好，稀释后的工作液不建议重复使用
3. 蛋白准备：根据所需用量，将蛋白储备溶液同样用 HEPES 缓冲液稀释至1mg/ml。
4. 在与细胞孵育前制备蛋白-转染试剂复合物，每孔推荐剂量：在 20µl 稀释蛋白溶液（4µl 1mg/ml 蛋白溶液与 16µl HEPES 缓冲液混合）中加入 30µl 稀释好的转染试剂溶液（4µl 1mg/ml 转染试剂工作液溶液与 26µl HEPES 缓冲液混合），孵育 1min，然后加入 450µl 无血清培养基（DMEM）稀释复合物。
5. 弃掉细胞培养基，用 PBS 缓冲液洗涤每孔，弃掉 PBS，然后每孔细胞中加入步骤4 制备的500µl 用无血清培养基稀释的蛋白-转染试剂复合物，孵育 4hr，可以检测到细胞的摄入水平。
注意事项1. 为了最佳转染效率，推荐实验当天细胞应达到 70-80%的密度。
2. 高效蛋白转染试剂需在无血清、无双抗条件下进行转染，使用含血清的正常生长培养基进行细胞铺板后，在加入复合物前需洗涤并移去生长培养基。也可根据细胞种类于转染6h 后加入含血清培养基。
3. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔蛋白、转染试剂的最终浓度均分别为8ug/mL（0.5ml），也可根据实验情况进行质量比调整。
4. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
6. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
附表转染前一天常见细胞接种量
| 培养器皿 | 表面积(cm2) | 细胞接种量 | 铺板培养基用量(ml) |
| 96 孔板 | 0.4 | 1×104-3×104 | 0.2 |
| 24 孔板 | 2 | 1×105-3×105 | 1 |
| 12 孔板 | 4 | 2×105-4×105 | 2 |
| 6 孔板 | 9 | 3×105-5×105 | 3 |
| 35mm 培养皿 | 9 | 3×105-5×105 | 3 |
| 60mm 培养皿 | 21 | 5×105-10×105 | 6 |
| 100mm 培养皿 | 55 | 1×106-3×106 | 15 |
| 25cm2培养瓶 | 25 | 5×105-10×105 | 7 |
| 75cm2培养瓶 | 75 | 1×106-3×106 | 20 |
