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基本信息-
产品名称高效mRNA转染试剂
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保存温度-20℃
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有效期1年
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应用mRNA 的体外转染
产品简介高效 mRNA 转染试剂是一种新型的阳离子脂质体转染试剂，可用于将mRNA高效地递送到真核细胞内。该转染试剂能够与 mRNA 形成带正电荷的非共价复合物，细胞膜表面带负电荷，能够将该复合体吸附，被吸附后的复合体能够通过膜的融合作用或者细胞内吞的方式形成包涵体进入细胞，并释放到细胞质中。整个输送过程低毒，并可有效地递送 mRNA。
操作步骤（仅供参考）(以 24 孔板单孔用量为例)
1. 转染试剂工作液准备：计算所需用量，用 NaAc 缓冲液（25mM，pH5.2）将转染试剂母液稀释10倍至1µg/µl；
备注：为确保重复性良好，稀释后的工作液不建议重复使用
2. 在 4 支 0.6ml 管中分别加入 0.5、1、2 或 3µl 转染试剂工作液，然后加入NaAc 缓冲液稀释到20µl。（例如，0.5µl 转染试剂工作液中加入 19.5µl NaAc 缓冲液进行稀释）；
3. 用 NaAc 缓冲液将 mRNA 稀释至 0.025µg/µl，然后将 20µl mRNA 加入到步骤2 稀释的20µl 转染试剂中，温和混匀，孵育 10min，最后将 40µl 复合物与 460µl Opti-MEM 混合。（即，24 孔板中每孔含有500µl转染培养基）；
4. 在孔内加入复合物之前，贴壁细胞必须用 PBS 至少洗涤一次，然后和复合物共同孵育24h。（8h后可以观察到转染的细胞）。
注意事项1. 为了最佳转染效率，推荐实验当天细胞应达到 70-80%的密度。
2. 高效 mRNA 转染试剂需在无血清、无双抗条件下进行转染，使用含血清的正常生长培养基进行细胞铺板后，在加入复合物前需洗涤并移去生长培养基。也可根据细胞种类于转染6 小时后加入含血清培养基。
3. 为了达到更好的转染效果，可根据实验需要优化 mRNA 与转染试剂的配比，推荐优化比例范围为 1:1~1:8（w/w, mRNA: mRNA 转染试剂）。例如：24 孔板，mRNA终浓度为0.5µg/孔（0.5ml），根据细胞类型最佳脂剂量可以为 0.5、1、2、3 或 4µg /孔。
4. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
6. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
附表转染前一天常见细胞接种量
| 培养器皿 | 表面积(cm2) | 细胞接种量 | 铺板培养基用量(ml) |
| 96 孔板 | 0.4 | 1×104-3×104 | 0.2 |
| 24 孔板 | 2 | 1×105-3×105 | 1 |
| 12 孔板 | 4 | 2×105-4×105 | 2 |
| 6 孔板 | 9 | 3×105-5×105 | 3 |
| 35mm 培养皿 | 9 | 3×105-5×105 | 3 |
| 60mm 培养皿 | 21 | 5×105-10×105 | 6 |
| 100mm 培养皿 | 55 | 1×106-3×106 | 15 |
| 25cm2培养瓶 | 25 | 5×105-10×105 | 7 |
| 75cm2培养瓶 | 75 | 1×106-3×106 | 20 |
