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斑马鱼产品
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基本信息-
别名2',7'-二氯荧光素二乙酸酯；2,7-荧光素二醋酸酯；2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯；2,7-二氯荧光素二乙酸酯
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CAS4091-99-0
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分子式C₂₄H₁₆Cl₂O₇
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分子量487.28
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纯度/级别≥97%
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溶解性溶于DMSO
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外观粉末，对空气和光敏感,密封保存
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光谱特性激发波长=504nm;荧光波长=529nm
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保存温度-20℃ 避光
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有效期1年
产品简介DCFH-DA，也称为2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯，可被细胞酯酶水解为2′,7′-二氯荧光素，然后主要被H₂O₂氧化为2′,7′-二氯荧光素。2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯可能对广泛的氧化反应具有反应性，这种反应性在细胞氧化应激期间可能会增加。这种探针被广泛用于监测细胞的氧化还原过程。细胞摄取后，DCFH-DA被细胞酯酶脱乙酰化为一种非荧光化合物，然后被活性氧（ROS）氧化为2′,7′-二氯荧光素（DCF）。DCF是一种荧光化合物，可以通过荧光光度计、流式细胞仪或荧光显微镜进行检测。
操作步骤(仅供参考)细胞样本染色步骤：
1.准备1-10mM的DMSO母液。未使用的DMSO母液应按比例分装，并在-20℃下避光保存。
2.在生理缓冲液(如PBS、HBSS或HEPES)中配制1-10uM的染料工作液。最佳工作浓度可通过预实验确定。
3.去除细胞的培养基，加入第2步的染料工作液，然后在室温或37℃下孵育细胞5到60分钟。
4.弃去染色工作液，用预热的HBSS洗涤，然后加入预热的HBSS或培养基，并在最佳温度下孵育。由于某些细胞类型的酯酶活性通常较低，最佳恢复时间可能因细胞类型而异。请根据实际情况调整。
5.在将细胞暴露于实验诱导剂之前，测定负载细胞样本的基线荧光强度。
6.阴性对照：
1)检测未染色细胞在绿色发射范围内的自发荧光。
2)对于流式细胞术，应确认细胞在染色和处理后，前向散射光和侧向散射光保持不变细胞大小的变化可能与处理过程中的溶血或收缩有关。
3)检测无细胞的染料与缓冲液/培养基混合物(有或无诱导剂)的荧光。在缺乏细胞外酯酶和其他氧化酶的情况下，荧光随时间的逐渐增加可能与自发水解、大气氧化和/或光诱导氧化有关。
7.阳性对照：可用H₂O₂或叔丁基过氧化氢(TBHP)刺激细胞，终浓度约为100μM。可根据细胞的敏感性和反应性增加或减少剂量。
注意事项1.溶解后，请将溶液分装保存，避免因反复冻融导致产品降解。
2.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
3.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
4.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
