- 生化试剂
- ELISA检测
-
抗体蛋白
二抗生物素标记 过氧化物酶(HRP)标记 胶体金试剂 FITC荧光标记 RBITC荧光标记 二抗免疫血清 其它荧光标记二抗 藻红蛋白(PE)荧光标记 胶体金(Gold)标记 SAlexa Fluor荧光系列 碱性磷酸酶(AP)标记 别藻蓝蛋白(APC)荧光标记 其它标记 PE标记二抗 DyLight标记二抗 AU标记二抗 Biotin标记二抗 AMCA标记二抗 Texas Red标记二抗 TRITC标记二抗 HRP标记二抗 未标记二抗 Cy标记二抗 AbBox Fluor标记二抗内参抗体 小分子抗体抗体标记试剂盒细菌抗体蛋白病毒包装试剂杂交瘤融合筛选WB、IHC、ELISA相关试剂细胞培养试剂病原微生物抗原抗体假病毒抗体校准品其他抗原抗体标记的标签抗体病理级IHC抗体重组蛋白
- 细胞培养
- 实验耗材
- 仪器设备
- 移液器类
订货时间：周一至周五
订货Q Q：79688691
订货邮件：79688691@qq.com
- CAS：100068-60-8
- 分子式：C₆₃H₁₀₁IN₂
- 分子量：1013.41
- 纯度：≥98%
基本信息-
中文名称DiR (细胞膜红色荧光探针)
-
中文别名DiR' [DiIC18(7)],用于膜染色；2-(7-(3,3-二甲基-1-十八烷基吲哚啉-2-亚基)庚-1,3,5-三烯-1-基)-3,3-二甲基-1-十八烷基-3H-吲哚-1-鎓碘化物
-
英文名称DiR' [DiIC18(7)]
-
英文别名DiR；Cy7 DiC18
-
CAS100068-60-8
-
分子式C63H101IN2
-
分子量1013.41
-
纯度≥98%
-
溶解性Soluble in DMSO(Need ultrasonic)
-
性状Solid
-
颜色Brown to reddish brown
-
Emission (Em)780
-
Excitation (Ex)748
-
保存温度-20℃
-
有效期1年
产品介绍DiR是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料常用于标记细胞质膜。DiR的两个18-碳链插入到细胞膜，从而进行特定的、稳定的细胞染色，几乎不会发生细胞间的染料转移。DiR（近红外荧光）和其他细胞膜荧光染料如 DiI（橙色荧光），DiO（绿色荧光），DiD（红色荧光）配合使用，为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。
DiR染色后可进行多聚甲醛（不可使用甲醇等其他试剂）的固定，但不建议在染色后进行透化的过程。此外，在固定透化（室温下用0.1% TritonX-100透化）后，也可以很好地进行质膜染色。
最大吸收波长/发射波长: 748/780 nm
推荐滤光片设置: 710 ex/760 em
图1.从脾脏分离的T细胞用DiR和i.v进行荧光染色。 （5x106个细胞/小鼠）注射到Nu / Nu小鼠中。 上面使用IVIS Spectrum注射后24小时拍摄的图像显示，细胞归巢于脾脏。
DiR染料是亲脂性的近红外花菁荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。18个碳的长链插入细胞膜中从而对细胞进行染色, 而细胞间的染料转移可以忽略不计。DiR的发射的是近红外荧光可以穿透细胞和组织，在活体成像中用来示踪。
DIR一般对原代细胞进行荧光染色并可进行活体成像分布观察, (例如下列细胞embryonic stem cells, bone marrow derived stem cells, adipose derived stem cells, lymphocytes and erythrocytes),
图2.通过将25 mg溶于3 mL乙醇来制备DiR储备液。 通过在5 mL PBS中稀释199 µL储备液来制备320 µg / mL的工作溶液。 从脾脏分离的T细胞与320 µg / mL DiR孵育。 孵育30分钟后，将细胞在4ºC下以1000 rpm离心离心3分钟，得到蓝色沉淀。 将细胞在PBS中洗涤两次并静脉内注射（5×106细胞/小鼠）。 对照组在PBS中每只小鼠注射5×106个细胞。 在注射后10分钟，1小时，6小时和24小时用IVIS Spectrum对小鼠成像。 用于DiR成像的理想滤光片组是710 nm激发和760 nm发射。 在所有时间点对小鼠的背侧和腹侧成像。 注射后24小时，收集脑，骨头，脾，肝，肺和肾用于离体成像。
非侵入性体内成像实时显示了向肝脏和脾脏注射的T细胞的归巢过程，这通过离体成像得到了证实。
操作步骤（仅供参考）制备储存液
用DMSO或无水乙醇配制1-5 mM的储备液。可参考下面的溶解配制表进行配制。
注：a.未使用的储存液建议分装储存在-20℃，避免反复冻融。b.吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO。
工作液的配制
用合适的缓冲液（如：无血清培养基或PBS等）稀释储液，配制成1-5μM的工作液。
注：a. 工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。b. 发现较难溶解时可以适当超声处理以促进溶解。c. 请根据实际情况调整工作液浓度，且现用现配。
染色悬浮细胞
1. 加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。
2. 37℃孵育细胞2~20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的 标记效果。
3. 孵育结束，1000~1500 rpm离心5min。倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
4. 重复步骤（3）两次以上。
染色贴壁细胞
1. 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2. 从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，但要使表面保持湿润。
3. 在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4. 37℃孵育细胞2~20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的 标记效果。
5. 吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2~3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5~10min，然后吸干培养基。 但要使表面保持湿润。
结果检测
样品可在培养基中进行检测，可通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析。
流式细胞仪检测：用DiO，DiI，DiD，DiS 和 DiR标记的细胞可分别使用常规FL1，FL2，FL3 和FL4流式细胞仪检测通道进行分析。
注意事项1. DiR染色固定的细胞或组织样品时，通常使用配制在PBS中的 4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
4. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
5. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
相关产品
