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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称Annexin V-APC / PI细胞凋亡检测试剂盒
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英文名称Annexin V-APC/PI Apoptosis Kit
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检测方法荧光法;流式
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样本类型细胞
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检测时间40min
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检测仪器流式细胞仪
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荧光APC
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Ex/Em650/660
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Channel setAPC
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自备试剂PBS(E-BC-R187), 去离子水
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运输条件冰袋
产品简介Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 (PS) 有高度亲和力。当细胞发生凋亡时，膜内侧的磷脂酰丝氨酸 (PS) 外翻到膜表面，而被荧光染料 APC 标记的Annexin V结合，可通过流式细胞仪或荧光显微镜进行检测。
由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，而碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）可与双链DNA特异性结合并产生强烈的荧光，与 Annexin V 搭配使用，可区分处于不同凋亡时期的细胞。
产品组成| 组分 | 20Assays | 50Assays | 100Assays | 200Assays | 保存温度 |
| Annexin V-APC Reagent | 100 μL | 250μL | 500μL | 1mL | 2-8℃ 避光 |
| Annexin V Binding Buffer(10×) | 1.4 mL×2 | 5.5mL | 11mL | 11mL×2 | 2-8℃ |
| PI Reagent (50μg/mL) | 100 μL | 250μL | 500μL | 1mL | 2-8℃ 避光 |
操作步骤（仅供参考）一步法
1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300×g离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。
2. 取 1~10 × 105重悬的细胞，300×g 离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer重悬细胞。
3. 细胞悬液中加入5μL的 Annexin V-APC Reagent 和5μL的PI Reagent (50μg/mL)。
4. 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15~20 min。
5. 立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。
注：流式细胞仪检测时 Annexin V-APC 可用APC通道，PI优先选择ECD通道，其次是PE通道；如果样本有FITC通道的自发荧光，则选择PerCP/Cy5.5 通道。
两步法
1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300×g离心5min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。
2. 取 1~10×105重悬的细胞，300×g离心5min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入100μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer重悬细胞。
3. 细胞悬液中加入2.5μL的Annexin V-APC Reagent和2.5μL 的PI Reagent (50μg/mL)。（由于两步法分辨率更高，染色液用量减半依然可得到媲美一步法的效果；用户亦可根据自己的模型进行滴定后加入适量的染色液，用更少的量获得高质量的结果。）
4. 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15~20min。
5. 加入400μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer，混匀样本。
6. 立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。
注：流式细胞仪检测时 Annexin V-APC可用APC通道，PI优先选择ECD通道，其次是PE通道；如果样本有FITC通道的自发荧光，则选择PerCP/Cy5.5通道。
储存与保存1.保存：2~8℃，避光保存
2.有效期：1年
注意事项1. 检测贴壁细胞时，需收集诱导凋亡后产生的悬浮细胞，并与后续收集的贴壁细胞一起检测。
2. 应尽量避免消化贴壁细胞带来的机械损伤。同时，胰酶的消化液中应尽量不含EDTA，因为EDTA会影响 Annexin V 与磷脂酰丝氨酸的结合。
3. 如果使用含 EDTA 的胰酶，收集细胞后应充分清洗，确保 EDTA 被去除干净。
4. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
5. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
6. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
8. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
9. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
