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二抗生物素标记 过氧化物酶(HRP)标记 胶体金试剂 FITC荧光标记 RBITC荧光标记 二抗免疫血清 其它荧光标记二抗 藻红蛋白(PE)荧光标记 胶体金(Gold)标记 SAlexa Fluor荧光系列 碱性磷酸酶(AP)标记 别藻蓝蛋白(APC)荧光标记 其它标记 PE标记二抗 DyLight标记二抗 AU标记二抗 Biotin标记二抗 AMCA标记二抗 Texas Red标记二抗 TRITC标记二抗 HRP标记二抗 未标记二抗 Cy标记二抗 AbBox Fluor标记二抗内参抗体 小分子抗体抗体标记试剂盒细菌抗体蛋白病毒包装试剂杂交瘤融合筛选WB、IHC、ELISA相关试剂细胞培养试剂病原微生物抗原抗体假病毒抗体校准品其他抗原抗体标记的标签抗体病理级IHC抗体重组蛋白
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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称细胞线粒体提取试剂盒
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保存温度2-8℃
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有效期1年
产品简介线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化，并通过偶联磷酸化生成 ATP，供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的，本试剂盒用简便快速的方 法即可在 40 分钟内提取得到线粒体。
本试剂盒可用于各种动物细胞和实体软组织样本的线粒体提取。最好用于新鲜细胞样品的线粒体提取，由于冷冻细胞样品的线粒体在冻存过程中可能被破坏，提取回收率可能大幅降低。
本试剂盒提取的线粒体可以用于各种线粒体功能研究、蛋白提取等下游应用。
产品组成| 组分 | 50T | 100T | 保存温度 |
| 组分A：线粒体提取液A | 20ml | 40ml | 2-8℃ |
| 组分B：线粒体提取液B | 20ml | 40ml | 2-8℃ |
| 组分C：线粒体保存液C | 20ml | 40ml | 2-8℃ |
1. 提取液长期不用时置于-20℃保存，15天内要多次使用的话置4℃保存即可。
2. 试剂拆封后请尽快使用完！
操作步骤（仅供参考）自备试剂和仪器
离心机、振荡器、匀浆机/匀浆器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒，PBS 缓冲液、蛋白定量试剂盒、离心管、吸头、一次性手套
使用方法
一、使用注意事项
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3. 最好使用标准 Dounce 匀浆器匀浆，如果没有标准 Dounce 匀浆器，用普通 1ml 玻璃匀浆器匀浆也可，但是线粒体回收率会下降。
二、细胞线粒体提取
1. 取 1-2×107 个细胞，在 4℃，500×g 条件下离心 2-3 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞；
2. 用冷 PBS 洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
【注】用 1000×g 力离心 5 分钟。
3. 细胞沉淀中加入 400μl 冷的试剂 A 重悬，置冰上 5 分钟。
4. 用 Dounce 匀浆器匀浆 30-40 下，然后在 4℃，500×g 条件下离心 5 分钟。
【注】先用 Dounce 匀浆器的松型槌初步匀浆 10-20 次，再用紧型槌匀浆 20-30 次。
【注】每上下一个来回为一次。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，弃沉淀。
6. 将上清在 4℃，1000×g 力条件下离心 10 分钟。弃沉淀，收集上清。
7. 将上清在 4℃，11000×g 力条件下离心 15 分钟。弃上清，收集沉淀。
8. 在沉淀中加入 400μl 冷的试剂 B，轻轻混匀。
9. 在 4℃，11000×g 力条件下离心 15 分钟。
10. 弃上清，沉淀用线粒体保存液 C 重悬。
【注】也可不用试剂盒中的线粒体保存液重悬。
【注】根据实验需要选择合适的缓冲液重悬线粒体或直接用于下游实验。
11. 即得到线粒体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。
注意事项1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
7. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
9. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
10. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
