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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称植物线粒体提取试剂盒(非酶法)
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保存温度2-8℃
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有效期1年
产品简介线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化,并通过偶联磷酸化生成ATP,供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的。
植物线粒体提取试剂盒用简便快速的方法提取得到线粒体。适用于各种植物组织样本和培养细胞。
本试剂盒提取得到的线粒体为完整的具有生物活性的线粒体,可以用于线粒体功能研究、线粒体蛋白提取等各种下游应用。
本试剂盒采用非酶法的快速提取方法,可以在一小时内快速提取得到植物线粒体,但是回收率比酶法线粒体提取试剂盒稍低。酶法提取得到的线粒体回收率会有增加,但是耗时较长。请根据不同的需要选择试剂盒。
产品组成| 组分 | 50T | 100T | 保存温度 |
| 组分 A:线粒体提取液 A | 100ml | 200ml | 2-8℃ |
| 组分 B:线粒体提取液 B | 50ml | 100ml | 2-8℃ |
| 组分 C:线粒体保存液 C | 20ml | 40ml | 2-8℃ |
1.试剂长期不用时可以置于-20℃保存。
2.试剂拆封后请尽快使用完!
操作步骤(仅供参考)自备试剂和仪器
离心机、振荡器、匀浆器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒,PBS缓冲液、蛋白定量试剂盒、离心管、吸头、一次性手套、细胞筛(100μm)。
使用方法
一、使用注意事项:
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
二、植物组织线粒体提取:
1. 取新鲜植物样本叶片,洗净擦干后去除叶梗和粗脉。1 g 植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
2. 加入 2ml 提取液 A 后用匀浆器充分匀浆或者用 Dounce 匀浆器充分匀浆。
【注】培养细胞直接收集细胞后直接用 Dounce 匀浆器匀浆即可,匀浆后加提取液混匀后直接进行后续操作。
【注】一般鲜嫩植物叶片样本,Dounce 匀浆器匀浆 40-50 次。
【注】每上下一个来回为一次。
3. 将匀浆液用 100μm 细胞筛过滤。
【注】没有细胞筛过滤条件,可以将匀浆液稍微静置,待大块未匀浆组织自然沉降,弃沉淀,吸取匀浆液即可。
【注】部分黏液较多的样本类型,不好吸取时,可以将吸头剪掉一点再吸取。
4. 在 2000×g 条件下离心 10 分钟,弃沉淀,吸取上清。
5. 在 3000×g 条件下离心 10 分钟,弃沉淀,吸取上清。
6. 将上清在 11000×g 条件下离心 20 分钟,弃上清,收集沉淀。
7. 在沉淀中加入 1ml 提取液 B,充分混匀。
8. 在 11000×g 条件下离心 20 分钟,弃上清,收集沉淀。
9. 沉淀即为线粒体。
10. 用试剂 C 或合适的其他缓冲液悬浮线粒体,置冰箱备用或直接用于下游实验。
【注】可以不用试剂 C 保存线粒体,根据下游实验需要用自己的缓冲液保存即可。
【注】用试剂 C 保存线粒体后,需要重新回收线粒体可以在11000×g 离心20 分钟收集沉淀
常见问题分析
提取的线粒体纯度为多少?
本试剂盒提取得到的线粒体样本纯度大约 85%。不建议用于蛋白质定位等方面的下游应用。
注意事项1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
7. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
9. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
10. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。



