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悬浮细胞siRNA/miRNA小核酸转染试剂  Cite:0    分享
SC-siRNA/miRNA

货号： SL1005
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规格:
0.1ml 0.5ml 1ml 1.5ml
单位:
瓶
单价:￥1000.00
基本信息
产品简介
产品特点
操作步骤（仅供参考）
注意事项
基本信息
  • 产品名称
    悬浮细胞siRNA/miRNA小核酸转染试剂
  • 保存
    -20°C 避光保存，一周内多次使用可暂放于 2-8°C
产品简介

本试剂可用来转染siRNA、miRNA mimics、miRNA inhibitor 等200bp以内的小分子RNA，可转染绝大多数悬浮细胞。目前，无论国外还是国内，悬浮细胞的核酸转染都是个热点难题，市场还缺乏真正有效的商品化的悬浮细胞小核酸转染试剂。本试剂能够高效转染绝大多数悬浮细胞，获得比较理想的基因敲除效果。对于大多数悬浮细胞，本试剂的细胞转染阳性率都在75%以上，而转染细胞死亡率不到10%。本试剂的使用也极其简便，先将siRNA与本试剂室温混合，再将siRNA-本试剂混合物直接加入含培养基的细胞，血清对转染效果没有影响，不必刻意添加或更换培养液。

产品特点

1. 卓越的悬浮细胞转染性能：细胞转染阳性率一般在75%以上，基因敲除效率在80%以上。
2. 极低的细胞毒性：转染细胞死亡率不到10%，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响。
3. 转染细胞范围广，绝大多数悬浮细胞都能获得比较理想的转染结果。

操作步骤（仅供参考）

本说明书适用于24孔培养板的转染实验，其他规格的培养板的用量参照下面表格，表格给出的是每孔的用量与体积。
A. 细胞接种
转染前一天接种细胞，接种细胞量（2-3）×105，每孔500μl培养基，转染前细胞生长状态保持良好，尽量不要使用抗生素。
B. siRNA-小核酸转染试剂混合物准备
1. 30 pmol siRNA用50μl无血清培养基稀释。
2. 3μl小核酸转染试剂 用50μl无血清培养基稀释。轻轻混匀，室温孵育5min。
注意：确保在25 min内执行第三步操作，不要过于延迟。
3. 孵育5min后，将siRNA稀释液与小核酸转染试剂稀释液混合（总体积100μl）。轻轻混匀，室温孵育20 min。
C. 将混合物加到培养的细胞内（完全培养基培养）
1. 将100μl混合物加入培养孔内，培养孔内含有0.5ml培养的细胞。轻轻晃动培养板5min，混匀。
2. 37°C培养24-72h，检测基因抑制效果。如果需要，细胞培养4-6h时可以更换培养基，但不是必须。孵育时间的长短，取决于细胞类型、 所干扰基因本身及分析方法。可设置不同的孵育时间进行实验以确定最佳孵育时间。

注意事项

1. 悬浮细胞转染难度较大，首次转染时，请务必对转染条件进行优化。例如：24 孔培养板，可进行如下交叉实验：

SC-siRNA/miRNAsiRNA(pmol)
2μl20、30、40、50
3μl20、30、40、50
4μl20、30、40、50

2. 转染时，细胞生长状态应保持良好，密度不能过大，培养液尽量不要使用抗生素，否则会导致细胞死亡增加。
3. 为了提高转染效率，转染后培养板可放于微型振荡器上培养或每隔1 小时人工晃动1次。

Culture vessel

Surface
area/well (cm2)

VoL.of growth
medium (µl)

VoL.of dilution
medium (µl)

siRNA Amount
(pmol)

SC-siRNA/miRNA(µl)
96-well 0.3100 2 × 10 60.6
48-well0.8250 2 × 25151.5
24-well2500 2 × 50303
12-wel41000 2 × 100604
6-wel102500 2 × 25015015

SC-siRNA/miRNA：悬浮细胞siRNA/miRNA小核酸转染试剂


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