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质粒DNA转染试剂盒(贴壁细胞)  Cite:0    分享

货号： SL1006
复制产品信息
规格:
0.1ml 0.5ml 1ml 1.5ml
单位:
盒
单价:￥650.00
基本信息
产品简介
产品特点
产品组成
操作步骤（仅供参考）
注意事项
附表
基本信息
  • 产品名称
    质粒DNA转染试剂盒(贴壁细胞)
  • 保存温度
    -20℃ 避光(勿反复冻融)
  • 有效期
    1年
产品简介

AC-DNA具有非常卓越的转染性能，可高效转染多种贴壁细胞，转染效率在贴壁细胞中可高达90%以上（Hela细胞、EGFP质粒）。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同，AC-DNA 采用生物可降解材料配制，对细胞的毒性很低，转染后细胞死亡率不到10%。AC-DNA 使用也非常方便，先将转染试剂与质粒DNA混合，再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中，血清不影响其转染效果，不必刻意添加或更换培养液， 操作十分简便。

产品特点

1. 卓越的细胞转染性能：可高效转染多种贴壁细胞，转染效率在贴壁细胞中可高达90%以上。
2. 极低的细胞毒性：使用可降解生物材料，细胞毒性低，转染细胞死亡率不到10%，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响，实验结果更为客观。
3. 操作简便，可用于含血清培养基培养细胞的转染，转染前后不需要更换培养液。

产品组成
组分规格
AC-DNA0.1ml 0.5ml 1.0ml 1.5ml
Trans buffer4mL 20mL 40mL60mL


操作步骤（仅供参考）

以24孔板转染为例
细胞接种
1. 转染前24小时左右对细胞进行转接，培养过夜；
2. 确保转染时细胞密度为90%左右；
3. 最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基，以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。
AC-DNA/DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染)
1. 在1.5ml无菌离心管中加入50µl Trans buffer，再加入适量的转染试剂，见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
2. 在1.5ml无菌离心管中加入50µl Trans buffer，再加入适量的DNA，见附表。用移液器再次轻轻混匀后在室温静置5分钟。
3. 将DNA-Trans buffer混合物滴加至AC-DNA-Trans buffer混合物中，用移液器轻轻混匀后在室温静置15~20分钟后，立即转染。注意：AC-DNA-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合次序非常重要，切勿颠倒。
注意：离心管最好使用聚丙烯离心管。
转染
1. 将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中，边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后，立即将培养板转入培养箱继续培养。
2. 培养12小时后即可观察，最佳观察或收获时间为24~48小时。
3.AC-DNA在完全培养基中仍有较高的转染效率，因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基，请于加入AC-DNA/DNA复合物12~24小时后进行。

注意事项

1. 转染前的细胞汇合度以90%左右为宜，转染时细胞生长状态应保持良好，不要有支原体污染。
2. 首次转染，建议进行优化实验，如24孔培养板，每孔质粒用量0.8ug，转染试剂用量可选择2.0ul、2.5ul、3.0ul、3.5ul进行优化。
3. 应避免转染复合物制备体系中存在血清，因血清会干扰AC-DNA与 DNA形成复合物，转染所用培养基中尽量不要使用抗生素。
4. 如果需要稳转，请在转染24-48h后加入筛选培养基。
适用细胞系：293T，A549，B16F10，HEK293，HeLa，Hepa1-6，HepG2，BHK-21，BNL.CL2，BRL-3A，C2C12，C6，Clone9，COS-1，COS-7，Daoy，DBTRG-05MG，DI-TNC1，DU145，HLF-a，Huh-7，K562，KB，KLN205，NCaP-FGC，MCF-7，MEL，Neuro-2a，NIH3T3，OVCAR3，PC3，PC-12，4T1，ACNN，BJ，BT-549，CACO-2，H460，H9C2，HCT116，Hep-3B，Hs578T，HT-1080，MCF10A，MDA-MB-231，NCI-H23，PANC-1，RAW264.7，Saos-2，RD，SK-MEL-28，SK-OV-3SW480，U2OS，Vero，293F，BE(2)C，CHO-S，CV-1，HT-29，Jurkat，RKO，SK-BR3等。

4. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

6. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。 


备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

附表

附表：不同培养体系推荐初始转染条件

培养皿96孔板48孔板 24孔板12孔板6孔板 10cm皿
表面积(cm2)0.351.0 1.9 3.8 9.6 59

Trans buffer、试剂、
DNA量

Trans buffer (μl) 20 50100200 4002000
AC-DNA (μl) 0.51.32.55.010 50
1μg/μl plasmid (μl) 0.16 0.4 0.81.63.216
完全培养基(ml) 0.10 0.25 0.501.02.010

AC-DNA：贴壁细胞质粒DNA转染试剂

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