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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称原代细胞质粒DNA转染试剂盒
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保存温度-20℃ 避光(勿反复冻融)
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有效期1年
产品简介PC-DNA 具有非常卓越的转染性能，可高效转染多种原代细胞，转染效率可高达85%以上（EGFP 质粒）。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同，PC-DNA 采用生物可降解材料配制，对细胞的毒性很低，转染后细胞死亡率不到 10%。PC-DNA 使用也非常方便，先将转染试剂与质粒DNA 混合，再将转染试剂-DNA 复合物直接加入培养细胞中，血清不影响其转染效果，不必刻意添加或更换培养液，操作十分简便。
产品特点1. 卓越的细胞转染性能：可高效转染多种原代细胞，转染效率可高达85%以上；
2. 极低的细胞毒性：使用可降解生物材料，细胞毒性低，转染细胞死亡率不到10%，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响，实验结果更为客观；
3. 操作简便，可用于含血清培养基培养细胞的转染，转染前后不需要更换培养液。
产品组成| 组分 | 规格 | |||
| PC-DNA | 0.1ml | 0.5ml | 1.0ml | 1.5ml |
| Trans buffer | 4mL | 20mL | 40mL | 60mL |
操作步骤（仅供参考）以24孔板转染为例
A. 细胞接种
1. 转染前24小时左右对细胞进行转接，培养过夜；
2. 确保转染时细胞密度为90%左右；
3. 最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基，以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。
B. PC-DNA/DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染)
1. 在1.5 ml无菌离心管中加入50µl Trans buffer，再加入适量的转染试剂，见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
2. 在1.5 ml无菌离心管中加入50µl Trans buffer，轻轻混匀，再加入适量的DNA，见附表。用移液器再次轻轻混匀后在室温静置5分钟。
3. 将混合物滴加至PC-DNA -Trans buffer混合物中， 用移液器轻轻混匀后在室温静置15~20分钟后，立即转染。
注意：PC-DNA - Trans buffer和DNA- Trans buffer的混合次序非常重要，切勿颠倒。
注意：离心管最好使用聚丙烯离心管。
C. 转染
1. 将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中，边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后，立即将培养板转入培养箱继续培养。
2. 培养12小时后即可观察，最佳观察或收获时间为24~48小时。
3.PC-DNA在完全培养基中仍有较高的转染效率，因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基，请于加入PC-DNA/DNA复合物12~24小时后进行。
注意事项1. 转染前的细胞汇合度以90%左右为宜，转染时细胞生长状态应保持良好，不要有支原体污染。
2. 首次转染，建议进行优化实验，如24孔培养板，每孔质粒用量0.8ug，转染试剂用量可选择2.0ul、2.5ul、3.0ul、3.5ul进行优化。
3. 应避免转染复合物制备体系中存在血清 。因血清会干扰PC-DNA与DNA形成复合物。转染所用培养基尽量不要使用抗生素，抗生素会导致培养细胞死亡。
适用细胞系：小鼠软骨细胞，大鼠软骨细胞，人关节软骨细胞，人肺静脉内皮细胞，人脐静脉内皮细胞，小鼠肺成纤维细胞，人肺癌上皮细胞，人乳腺癌上皮细胞，人结肠癌细胞，人气管上皮细胞，人肝癌细胞，人宫颈癌上皮细胞，前列腺癌上皮细胞，大鼠肺静脉平滑肌细胞，人肺动脉平滑肌细胞，大鼠心肌细胞，人纤维肉瘤细胞，大鼠骨骼肌细胞，人横纹肌肉瘤细胞，人胶质母细胞瘤细胞，人黑色素瘤细胞，人神经母细胞瘤细胞，小鼠肝癌细胞，小鼠胚胎成纤维细胞，等等。
附表：不同培养体系推荐初始转染条件
| 培养皿 | 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 | 10cm皿 | |
| 表面积(cm2) | 0.35 | 1.0 | 1.9 | 3.8 | 9.6 | 59 | |
Trans buffer、试剂、 | Trans buffer (μl) | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 | 2000 |
| PC-DNA (μl) | 0.5 | 1.3 | 2.5 | 5.0 | 10 | 50 | |
| 1μg/μl plasmid (μl) | 0.16 | 0.4 | 0.8 | 1.6 | 3.2 | 16 | |
| 完全培养基(ml) | 0.10 | 0.25 | 0.50 | 1.0 | 2.0 | 10 | |
PC-DNA：原代细胞质粒DNA转染试剂
4. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
6. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
