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同类产品满5赠1 - 用途：测细胞自噬,自发荧光染料丹酰尸胺或单丹磺酰尸胺（MDC）通常用于监测自噬，该方法适用于荧光显微镜和荧光酶标仪
基本信息-
产品名称细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)
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保存温度按试剂盒各组分温度保存
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有效期1年
产品简介■ 自噬（autophagy）是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器，最终将吞噬物在溶酶体内降解的过程，自噬体（autophagosome）为双层膜包被的圆形或椭圆形结构，内含细胞质、长寿蛋白质和异种蛋白聚集物、损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。自噬是一种进化上保守的降解过程，通过溶酶体途径将长寿命蛋白、细胞器及其他细胞质等组分进行降解，自噬通路的激活对多种细胞功能都是必需的，包括饥饿状态下的存活、细胞内组分清除、发育及免疫等过程。丹酰尸胺（Dansylcadaverine，MDC ），是一种嗜酸性的荧光色素，通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂，其检测激发滤光片波长 355~380nmnm，阻断滤光片波长 512~530nm。
■ 本品细胞自噬染色检测试剂盒（MDC 法）又称为MDC染色液，适用于培养细胞的荧光自噬染色观察，又可用 FACS 检测细胞自噬发生的比例，可与EB合用双染。
产品组成| 组分 | 100T | 保存温度 |
| 试剂（A）: MDC Stain(10×) | 1ml | -20℃ 避光 |
| 试剂（B）: Stain Buffer | 50ml | 室温 |
| 试剂（C）: Wash Buffer | 100ml | 室温 |
操作步骤（仅供参考）自备材料
1. 低速离心机、1.5ml离心管、载玻片、盖玻片、96孔板、荧光显微镜、流式细胞仪
2. 培养液、蒸馏水、磷酸盐缓冲液
操作步骤（仅供参考）
一 玻片法
1. 收集细胞，用300～500μl 的 Wash Buffer清洗细胞 1 次，800～1000rpm离心5min，弃上清，加入适量的 Stain Buffer 重悬细胞，计数并调节细胞浓度至106/ml。
2. 取 90μl 细胞悬液至新的 1.5ml 离心管中，加入 10μl 的 MDC Stain(10×)，轻轻混匀。
3. 37℃或室温避光染色 15～60min。
4. 800～1000rpm 离心 5min，弃上清，收集细胞，用 300～500μl 的Wash Buffer 清洗细胞 2 次，800～1000rpm离心5min，弃上清。
5. 加入 100μl 的 Wash Buffer 重悬细胞，滴加于载玻片上并加盖玻片。
6. 荧光显微镜观察计数并拍照，也可用流式细胞仪检测药物干预组MDC 阳性细胞百分比。
二 96孔板法
1. 轻轻吸除 96 孔板中的培养液，各孔加入10μl MDC Stain(10×）和90μl 的Stain Buffer，37℃ 5%CO2 条件下避光孵育15～60min。
2. 各孔加入 100μl Wash Buffer清洗2～3次，荧光显微镜或流式细胞仪检测观察。
三 MDC与EB双染法
1. 收集细胞，用300～500μl 的 Wash Buffer 清洗细胞 1 次，800～1000rpm离心5min，弃上清，加入适量的 Stain Buffer重悬细胞，计数并调节细胞浓度至106/ml。
2. 取90μl 细胞悬液至新的1.5ml离心管中，加入10μl MDC Stain(10×）和0.2uM EB染色液，轻轻混匀，滴加于载玻片上，室温避光染色15～60min，加盖玻片。
3.荧光显微镜或流式细胞仪检测观察。
染色结果
荧光染色结果：药物干预组细胞呈现了更高的荧光强度和更多的亮绿色MDC 标记颗粒；
FACS 检测结果：药物干预组 MDC 阳性细胞百分比高于对照组。
注意事项1. MDC Stain 和 EB 对人体有一定害处，请小心操作。
2. 收集细胞前可在培养液中加入不同浓度的药物培养一定时间，诱导细胞自噬。
3. 操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
4. Wash Buffer 可用 PBS 代替。
5. 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
6. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
8. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
9. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
