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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称PBS-Triton溶液(破膜剂,0.5%)
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保存温度2-8℃
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有效期1年
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应用去污剂、细胞破膜剂,免疫染色强力通透液(Triton X-100)
产品简介■ 破膜剂亦称通透液,通常可以通过使用有机溶剂例如甲醇、丙酮等,或者使用去垢剂例如 Triton X-100、Saponin 等来实现对于细胞膜的通透。
■ 甲醇或丙酮等有机溶剂,一方面可以溶解细胞膜和核膜从而充分暴露细胞浆和细胞核中的目的蛋白等,另一方面也可以使细胞内的蛋白变性起到固定的作用。其优点是操作比较简单,一步处理可以同时实现固定和通透,缺点是膜蛋白也会被溶解掉并且有些蛋白变性后不利于后续的检测,因此有机溶剂使用相对较少,仅用于一些要求比较粗糙的检测。
■ TritonX-100 是常用的通透试剂,可以通透细胞膜和核膜,作用原理是非特异性地溶解细胞膜,缺点是不利于膜蛋白的检测,但当使用多聚甲醛进行交联和固定后,相当一部分膜蛋白会被交联固定,从而不会被 Triton X-100 溶解,因此后续仍然能检测到。
■ Saponin 可以特异性地溶解细胞膜中的胆固醇,从而实现在细胞膜上选择性地打孔,其优点是适合于细胞膜蛋白的检测,特别适合通过流式细胞仪检测细胞膜上的标志性蛋白,缺点是对于一些胆固醇含量低的细胞通透效果差,通透效果弱于 Triton X-100 和有机溶剂,并且不能通透胆固醇含量很低的核膜和线粒体膜。对于凝集素(lectin)的检测,含 Triton X-100 等非特异性去垢剂的通透液的效果显著优于主要含 Saponin 的通透液。
■ 本品PBS-Triton 溶液(破膜剂,0.5%)亦称为免疫染色通透液,主要由PBS 磷酸盐缓冲液 (0.01M,pH7.4)、0.5%Triton X-100 组成,可以用于免疫染色等多种原位检测时细胞样品、冰冻或石蜡切片的通透处理,有助于暴露抗原、核酸等作用靶点,使抗体、探针或标记物等更容易进入细胞内,从而确保染色等的检测效果。本产品通透能力强,推荐用于各种常规的免疫荧光、免疫组化、免疫细胞化学、流式检测等中细胞的通透。
■ 本产品为即用型工作液,可以直接使用,无需稀释。
操作步骤(仅供参考)1. 对于切片,在固定、洗涤结束后,每样滴 50~100μl PBS-Triton 溶液,也可以在染色缸中完全浸没进行通透。
2. 对于细胞样品,在固定、洗涤结束后,按照六孔板每孔加入 1 毫升PBS-Triton 溶液,其它多孔板参考该比例加入。
3. 对于其它样品,加入 PBS-Triton 溶液的量以充分盖住样品为准。
4. 通常在 PBS-Triton 溶液中室温孵育 5~10 分钟,即可完成通透。对于较难通透的样品或者要求通透特别充分的情况,可以在室温孵育 10~30 分钟。
注意事项1. 对于通透效果要求不高的情况,也可以使用或免疫染色洗涤液(F14642)。
2. 对于需要检测细胞膜蛋白的情况推荐使用 PBS-Saponin 溶液(破膜剂,0.5%)(F22953)。
3. 对于通透要求比较高的情况,可以使用PBS-Triton溶液(破膜剂,0.3%)(F12716)或PBS-Triton溶液(破膜剂,0.5%)(F12757)。
4. 对于凝集素 (lectin) 的检测推荐使用本产品或PBS-Triton溶液(破膜剂,0.1%)(F12717) 。
5. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
6. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
7. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
8. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
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