- 细胞类
- 生化试剂
- ELISA检测
-
抗体蛋白
二抗生物素标记 过氧化物酶(HRP)标记 胶体金试剂 FITC荧光标记 RBITC荧光标记 二抗免疫血清 其它荧光标记二抗 藻红蛋白(PE)荧光标记 胶体金(Gold)标记 SAlexa Fluor荧光系列 碱性磷酸酶(AP)标记 别藻蓝蛋白(APC)荧光标记 其它标记 PE标记二抗 DyLight标记二抗 AU标记二抗 Biotin标记二抗 AMCA标记二抗 Texas Red标记二抗 TRITC标记二抗 HRP标记二抗 未标记二抗 Cy标记二抗 AbBox Fluor标记二抗内参抗体 小分子抗体抗体标记试剂盒细菌抗体蛋白病毒包装试剂杂交瘤融合筛选WB、IHC、ELISA相关试剂细胞培养试剂病原微生物抗原抗体假病毒抗体校准品其他抗原抗体标记的标签抗体病理级IHC抗体重组蛋白
- 细胞培养
- 实验耗材
- 仪器设备
- 生化试剂盒
- 小分子试剂
- 基质胶
-
斑马鱼产品
订货时间：周一至周五
订货Q Q：79688691
订货邮件：79688691@qq.com
基本信息-
产品名称GST pull-down蛋白结合缓冲液（PH8.0）
-
规格500ML
-
主要组分Tris-HCl 、NaCl 、 EDTA 、 NP-40、 DTT、 MgCl₂
-
储存条件4℃
-
有效期1年
产品应用本产品可以用于蛋白-蛋白（GST pull-down）相互作用的研究。
GST pull-down实验大致有两种用途，其一是鉴定已知GST标签蛋白与另一蛋白的相互作用；其二是大量捕获各种可能的与“诱饵”蛋白有相互作用的多种蛋白，以用于质谱分析、检测和鉴定。
操作步骤（仅供参考）a. 轻轻摇动GST-tag蛋白纯化介质，使其完全重悬，吸取适量50%的凝胶悬液至离心管中(每个样品需要50μl 50%的凝胶悬液)，加入20倍体积的GST pull-down蛋白结合缓冲液(例如50μl 50%的凝胶悬液加入1ml蛋白结合缓冲液)，颠倒混匀以平衡凝胶。1000g离心2分钟，小心吸除管内液体。加入与凝胶等体积的GST pull-down蛋白结合缓冲液重悬凝胶以获得平衡好的50%凝胶悬液(例如起始为50μl 50%的凝胶悬液加入25μl GST pull-down蛋白结合缓冲液重悬)。
b. 参考下表，依次加入GST pull-down蛋白结合缓冲液、经步骤a平衡好的GST-tag蛋白纯化介质、靶蛋白和GST标签蛋白(诱饵蛋白)或GST蛋白(阴性对照)。
| 组分 | 阴性对照1 | 阴性对照2 | 样品管 |
| GST pull-down蛋白结合缓冲液 | 400μl | 400μl | 400μl |
| 平衡好的50%凝胶悬液 | 50μl | 50μl | 50μl |
| 靶蛋白样品 | 25μl | 25μl | 25μl |
| GST蛋白（对照） | - | 25μl | - |
| GST标签蛋白（诱饵蛋白） | - | - | 25μl |
| GST pull-down蛋白结合缓冲液 | 补足至相同的终体积（0.5-1ml） | ||
c. 颠倒混匀各管，置于侧摆摇床上，4ºC孵育2h或过夜。
d. 4ºC 1000g离心2分钟，将上清转移至新的离心管中，留作后续分析。
e. 加入100μl GST pull-down蛋白结合缓冲液重悬凝胶，4ºC离心(1000g×10s)，小心吸除上清。
f. 重复步骤e 2次，以充分洗去未结合的蛋白。
g. 加入50μl GST pull-down洗脱缓冲液，轻轻晃动并孵育10分钟。
注：也可以直接向凝胶中加入25μl SDS-PAGE上样缓冲液(2X)，煮沸5分钟后离心(12000g×1min)取上清用于后续检测。
h. 4ºC 1000g离心2分钟，小心吸取上清用于后续检测。后续常用于SDS-PAGE后考马斯亮蓝染色、银染或者Western检测。
注意事项1.我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
2.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
3.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
4.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
