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GST标签蛋白琼脂糖磁珠  Cite:0    分享

货号: FY0104
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规格:
2ml(实体积1ml) 10ml(实体积5ml) 25ml(实体积12.5ml)
单位:
单价:¥1265.00
基本信息
产品简介
操作步骤(仅供参考)
注意事项
基本信息
  • 中文名称
    GST标签蛋白琼脂糖磁珠
  • 基质
    高度交联的 4%琼脂糖磁珠
  • 配体
    谷胱甘肽
  • 载量
    5∽10mg GST 蛋白
  • 粒径
    30∽100μm
  • 耐压流速
    80∽150cm/h(0.3MPa,3bar)
  • 磁珠浓度
    磁珠体积占悬浮液体积的 50%
  • 储存缓冲液
    含 20%乙醇的 1×PBS
  • 保存温度
    2-8℃
  • 有效期
    2年
产品简介

GST 标签蛋白琼脂糖磁珠是专为高效、快速纯化 GST 标签蛋白而设计的新型磁性微球产品,可以在磁场作用下直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,极大的简化了纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业客户高通量地进行 GST 标签蛋白的纯化。
与传统的柱层析方法相比,使用 GST 标签蛋白琼脂糖磁珠无需控制上样流速,更不需要昂贵的层析设备和离心设备,样品与磁珠的结合以及目的蛋白与磁珠的分离变的非常简单、快捷,而且更容易实现高通量、自动化的蛋白纯化方法。
GST 标签蛋白琼脂糖磁珠是由高度交联的 4%琼脂糖磁珠为基质,通过 12 个原子的间隔臂,用化学方法共价结合了还原型谷胱甘肽制作而成,用于纯化各种表达系统融合表达的 GST 标签重组蛋白。

操作步骤(仅供参考)

1. 准备 buffer
结合/洗涤缓冲液和洗脱缓冲液等缓冲液请自行准备或购买我司 GST 标签蛋白纯化试剂盒。
2. 样品准备
以大肠杆菌表达系统,500mL 诱导菌液为例。
1) 4℃离心 30min(4000xg)收集菌体,弃上清。
2) 用预冷结合/洗涤缓冲液重悬菌体,如果需要,可加入适量的抑制剂,如蛋白酶抑制剂(PMSF)或其他蛋白酶抑制剂等。
3) 用超声波破碎法在冰上破碎菌体,直到样品破碎完全。
4) 4℃离心 20min(12,000xg),分离上清和沉淀,并过滤除杂。将上清和沉淀留样以备后续检测。
2. 纯化重组 GST 标签融合蛋白
1) 将 GST 标签蛋白琼脂糖磁珠充分混匀,取 2mL 磁珠悬浮液,置于 50mL 离心管中,再加入 10mL 结合/洗涤缓冲液,充分混匀后,磁性分离,弃上清,重复上述步骤 1 次。
3) 将制备好的含有 GST 标签的融合蛋白上清加入到处理好的磁珠中,混匀后将离心管置于混匀仪上,室温孵育 1∽2h。(也可置于 2∽8℃孵育 2∽4h 或者过夜)
4) 孵育结束后,将离心管置于磁力架上,磁性分离,吸取上清,作为流穿,置于 2∽8℃,以备后续检测。向离心管中加入 15mL 结合/洗涤缓冲液,置于混匀仪混匀10∽15min,然后磁性分离,吸取上清(保留,以备取样检测)。重复上述步骤 4 次。
5) 加入 1mL 洗脱缓冲液,吹打混匀 10∽20 次后,通过磁力架分离上清至 1.5mL 的 Ep 管收集,重复操作,分别收集 5∽10 管洗脱液。
6) SDS-PAGE 检测将得到的样品(包括流穿、洗涤液和洗脱液)以及原始样品使用 SDS-PAGE 检测纯化效果。加入适量蛋白快速染色液浸没 PAGE 胶,然后置于摇床上摇动,染色 10∽30min 即可观测结果。
注:目的蛋白保存前应透析或者超滤以去除游离谷胱甘肽。再分装冻存到-80℃。
磁珠再生及储存
磁珠再生步骤请参考或直接购买我司 GST 标签蛋白纯化再生试剂盒。
磁珠再生后,可以立即使用,如不立即使用需加入等体积 20%乙醇,置于 2∽8°C 保存。

注意事项

1. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

3. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

4. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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