- 生化试剂
- ELISA检测
-
抗体蛋白
二抗生物素标记 过氧化物酶(HRP)标记 胶体金试剂 FITC荧光标记 RBITC荧光标记 二抗免疫血清 其它荧光标记二抗 藻红蛋白(PE)荧光标记 胶体金(Gold)标记 SAlexa Fluor荧光系列 碱性磷酸酶(AP)标记 别藻蓝蛋白(APC)荧光标记 其它标记 PE标记二抗 DyLight标记二抗 AU标记二抗 Biotin标记二抗 AMCA标记二抗 Texas Red标记二抗 TRITC标记二抗 HRP标记二抗 未标记二抗 Cy标记二抗 AbBox Fluor标记二抗内参抗体 小分子抗体
- 细胞培养
- 实验耗材
- 仪器设备
- 移液器类
订货时间:周一至周五
订货Q Q:79688691
订货邮件:79688691@qq.com

-
中文名称Follzol 总RNA提取试剂
-
性状液体
-
保存温度2-8℃(室温下能稳定保存12个月,为达到最佳效果,建议保存在2-8℃)
-
有效期1年

Follzol是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。本试剂适用范围广泛,可以从动物组织、 植物材料、 各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。 该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。样品在Follzol中被充分裂解的同时能够最大限度地保证RNA的完整性。在加入氯仿离心后,溶液会分成三层:上层无色水相、中间层和下层红色有机相,RNA分布在上清层中。收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好,无蛋白和DNA污染,可用于各种分子生物学常规实验,如RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern blot、Dot Blot、体外翻译等。
Follzol试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7kb和15kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280 比值≥1.8。注意如果是普通琼脂糖凝胶电泳,28S的位置大约在2kb,18S大约在1kb的位置,不同浓度的凝胶位置变化较大。

RNA抽提操作步骤: (实验前请先阅读注意事项)
提示:用Follzol抽提RNA时要戴手套和护眼罩。避免接触皮肤和衣服。在化学通风橱完成操作。避免呼吸道吸入。如无特殊说明,所有的操作应该在在15~30°C的室温条件下。
1. 匀浆
a.植物组织:取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接Follzol中迅速研磨,每50-100mg组织加入1ml Follzol,混匀。注意:样品体积一般不要超过Follzol体积的10%。
b.动物组织:取新鲜或-70℃冻存动物组织尽量剪碎,每30-100mg组织加入1ml Follzol,匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入Follzol 1ml混匀。注意:样品体积一般不要超过Follzol体积的10%。
c.单层培养细胞:尽量去除干净残留培养液后直接往直径3.5cm的培养板中加入1ml的Follzol覆盖并反复吹打裂解细胞。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的Follzol量(每10cm2加1ml)。当Follzol量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。
注意:贴壁培养细胞往往不能完全从培养瓶(皿)脱落,这并不意味着裂解不完全,此时细胞膜实际已经完全破裂开,并已释放出全部RNA,继续做即可。
d.细胞悬液: 离心收集细胞。 在Follzol试剂中用移液管反复吹打来裂解细胞。每5~10×106的动物细胞,植物或酵母菌细胞或每1×107细菌加1ml的Follzol。在加入Follzol前应避免洗涤细胞,因为那样会增加mRNA降解的可能性。破裂某些酵母菌和细菌可能需要使用匀浆器。
e.血液:推荐使用本公司的Follzol LS(货号:F15003),这是全血或者液体样品专用的Follzol,LS就是Liquid Sample液体样品的首字母简写。相当于Invitrogen公司的TRIzol LS 。
2. 将匀浆样品剧烈震荡后在室温条件下放置5分钟以使核蛋白体完全解离。
3. 可选步骤: 在4°C的条件下以12,000 rpm的离心力离心10分钟,取上清。
如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或肌肉,植物的块茎结节等可离心去除。离心后的沉淀中包含有细胞外膜,多糖,以及高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织的样品时,上层是大量油脂应除去。取澄清的匀浆液进行下一步。
4. 每1ml Follzol加0.2ml氯仿。盖紧管盖,剧烈震荡15秒并将其在室温下放置2~3分钟。
5. 在4°C 12,000 rpm的离心力高速冷冻离心10-15分钟。离心后混合物分成三层:下层红色有机苯酚氯仿层,中间层,上层无色的水样层。RNA无一例外地存在于水样层当中。水样层的容量大约为所加Follzol容量的50-60%。(有机层和中间层是蛋白和DNA,如果需要提取,请联系我们索取提取方法)。
6. 将水样层转移到一干净的离心管中,加入等体积异丙醇。 颠倒混匀后室温放置10分钟。
RNA沉淀在离心前通常不可见,离心后在管侧和管底形成胶状沉淀。
7. 在室温或者4°C 12,000 rpm离心10分钟,弃上清。
8. 加入75%乙醇洗涤沉淀。每使用1ml Follzol用1ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
9. 在室温或者 4°C 12,000 rpm离心3分钟,弃上清,注意不要丢失RNA沉淀。
注意:剩余的少量液体可短暂离心,然后用枪头吸出,注意不要吸弃沉淀。
10. 室温放置2-3分钟,晾干。加入30-100μl RNase free water,充分溶解RNA,得到的RNA保存在-70℃,防止降解。
注意:沉淀不要过分干燥,以免难于溶解。

1. 本品中含有苯酚,具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品,如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触,应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
2. 样品用Follzol匀浆后,如果不即刻加入氯仿之前,,置于-70°C下可放置一个月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短,容易降解,建议提取后尽快进行后续实验,如反转录成cDNA,Northern Blot等。
3. 若下游实验对DNA非常敏感,建议用RNase free DNase I对RNA进行处理。
4. 自备试剂:氯仿、异丙醇(新开封或提取RNA专用)、75%乙醇(用 DEPC处理过的水配制)、RNase free water或者DEPC处理过的水。
5. 本公司生产Follzol质量优异,可以完美替代 Invitrogen 的Trizol Reagent。提取质量和下游实验完全一样。
6. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
7. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
8. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级,请以实际收货标签信息为准。