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二抗生物素标记 过氧化物酶(HRP)标记 胶体金试剂 FITC荧光标记 RBITC荧光标记 二抗免疫血清 其它荧光标记二抗 藻红蛋白(PE)荧光标记 胶体金(Gold)标记 SAlexa Fluor荧光系列 碱性磷酸酶(AP)标记 别藻蓝蛋白(APC)荧光标记 其它标记 PE标记二抗 DyLight标记二抗 AU标记二抗 Biotin标记二抗 AMCA标记二抗 Texas Red标记二抗 TRITC标记二抗 HRP标记二抗 未标记二抗 Cy标记二抗 AbBox Fluor标记二抗内参抗体 小分子抗体抗体标记试剂盒细菌抗体蛋白病毒包装试剂杂交瘤融合筛选WB、IHC、ELISA相关试剂细胞培养试剂病原微生物抗原抗体假病毒抗体校准品其他抗原抗体标记的标签抗体病理级IHC抗体重组蛋白
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基本信息-
中文名称Follzol 总RNA提取试剂(免氯仿)
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保存温度2-8℃
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有效期1年
产品简介Follzol 总RNA提取试剂(免氯仿)是传统Trizol 的免氯仿升级版，广泛适用于从各类动物组织、植物材料、培养细胞、细菌等样品中提取Total RNA和Small RNA。与传统Trizol提取方法相比，本产品不需要使用氯仿进行分层，操作更简单，且全程可在常温进行。本产品提取的RNA基本不残留DNA，提取的RNA可以直接用于cDNA克隆、qRT-PCR检测、mRNA 纯化、体外翻译、Northern、点杂交、高通量测序等各种分子生物学实验
操作步骤（仅供参考）一、样本处理
样本匀浆
1. 植物组织：取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在Follzol中迅速研磨，每25~50mg组织加入0.5mL Follzol，混匀。
2. 动物组织：取新鲜或-70°C 冻存动物组织尽量剪碎，每15~50mg组织加入0.5 mL Follzol，匀浆仪进行匀浆处理，或在液氮中研磨后加入0.5mL Follzol混匀。
3. 培养细胞：尽量去除干净残留培养液后直接往直径3.5cm的培养板中加入0.5mL Follzol覆盖并反复吹打裂解细胞。
【注】a. 根据培养板的面积加Follzol （每10cm2加0.5mL）。
b. 当Follzol量不足时可能导致抽提的RNA中有DNA污染。
c. 贴壁细胞不能完全脱落时，并不是裂解不完全，此时细胞膜已经完全破裂，并释放RNA，继续实验即可。
4. 细胞悬液： 离心收集细胞，在Follzol试剂中用移液管反复吹打来裂解细胞。每1~5×106的动物细胞，植物细胞或每5×106细菌加0.5mL Follzol。
【注】在加入Follzol前应避免洗涤细胞，易造成mRNA降解。破裂某些细菌可能需要使用匀浆器。
5. 液体样本：每200μL（低于200μL时，可用RNase-free H2O补足）血浆、血清等液体样本，加入0.5mL Follzol后振荡混匀 。
二、总RNA提取
1. 向上述裂解液中加入2/5体积的RNase free 水(每 500μL Follzol加200μL水)，剧烈振荡混匀，室温静置 5min。
【注】当处理样本量大于50mg时，可延长室温静置时间至10~15min。
2. 室温12000rpm离心15min。
3. 离心后溶液分成上层水相(含RNA)和下层沉淀(含蛋白质、DNA、多糖等杂质)，小心吸取上层水相至新离心管中。
【注】a.上层水相体积约为总体积的90%，如使用500μL Follzol进行提取，上层水相约为630μL左右，建议吸取500μL，以免吸到中间层造成污染；提取微量样本时，为减少损失可转移全部上清。
b.当样本量较小时，离心后可能不会出现下层沉淀，属于正常现象，可继续按后续步骤完成提取。
c. 加入等体积异丙醇，颠倒混匀，室温静置10min。
5. 室温12000rpm离心10min。通常出现白色沉淀，小心弃去上清。
【注】RNA沉淀在离心前通常不可见，离心后在管侧壁和管底形成薄片状沉淀（样品量少的情况下，RNA沉淀散在管侧壁，管底可能未见明显沉淀）。部分组织材料由于含有较多的代谢产物，导致沉淀不能聚集而分散在离心管壁上，请沿液面小心缓慢吸取弃上清。
6. 加入1mL 75%乙醇(RNase free水配制)漂洗，涡旋震荡15 sec，让沉淀悬浮起来，并上下颠倒数次。
7. 室温12000rpm离心3min，小心弃上清。
8. 重复步骤6和7漂洗一遍，小心弃上清。
【注】为减少杂质残留，应尽可能的弃尽上清，只保留管底及管侧壁的白色RNA沉淀。
9. 室温晾干约1min，加入适量约50~100 μL RNase free水溶解沉淀，轻弹离心管底，让水充分接触管底和管侧壁的沉淀帮助溶解RNA（可用移液器反复吹打管底和管侧壁的沉淀帮助溶解），使RNA沉淀充分溶解。提取的RNA产物可以分装后在-80°C长期保存，短期保存放置-25~-15℃。
【注】a.稍稍晾干RNA沉淀即可，过度干燥会导致RNA溶解度降低。
b.从某些样本提取RNA时，RNA沉淀并非完全聚集在离心管管底，而是也以均匀的薄雾状沉淀吸附在管侧壁上。请注意仔细观察，并用移液器吹打管底和沉淀所在的管侧壁充分溶解所有的RNA。
注意事项1. 本品中含有苯酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触，应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
2. 请穿实验服并佩戴一次性手套口罩操作，避免RNase污染。
3. 需自备异丙醇（新开封或提取RNA专用）、75%乙醇(RNase free水配制)、 RNase free水或者DEPC处理水。
4. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
6. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
