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基本信息-
产品名称siRNA/miRNA 体内转染试剂
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保存温度2-8℃
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有效期1年
产品简介siRNA/miRNA 体内转染试剂是一种新型高效阳离子聚合物，可与RNA(包括siRNA、miRNA、重组 RNA)相互作用形成纳米复合物，从而用于 RNA 的体内递送。siRNA/miRNA体内转染试剂具有递送效率高，安全性好等特点。siRNA/miRNA 体内转染试剂通过内吞作用进入细胞后，表达“质子海绵效应”的特性，缓冲内体 pH 值，保护 RNA 不被降解，连续的质子内流也可引起核内体渗透肿胀和破裂，为 RNA 逃逸到细胞质提供了机制。
产品特点1. 递送效率高
2. 安全性好
产品组成| 组分 | 规格 | 保存温度 |
| siRNA/miRNA 体内转染试剂 | 0.8ml | 2-8℃ |
| 10%葡萄糖溶液（DEPC 水配置） | 4ml | 2-8℃ |
操作步骤（仅供参考）（1）试剂要求
为了形成大小均一且形态稳定的siRNA/miRNA 体内转染试剂/RNA纳米复合物，推荐使用 5%无菌无酶等渗葡萄糖溶液（提供 10%无菌无酶葡萄糖溶液，体内注射时终浓度稀释至5%）。
如果稀释 RNA 的溶液含盐量高可能导致与siRNA/miRNA 体内转染试剂形成复合物时产生沉淀。
RNA 使用 PAGE 或 HPLC 进行纯化。
（2）推荐 RNA 量及注射量
根据动物模型、给药途径、作用靶器官确定 RNA 使用量，表 1 给出了在啮齿动物中RNA转染的推荐配比剂量。
最终注射液 RNA 浓度不超过 0.5 μg/μL 以免产生沉淀。
RNA 与siRNA/miRNA 体内转染试剂的推荐使用比例为质量体积比1:1 (w/v，1μgRNA: 1 μL siRNA/miRNA 体内转染试剂)。
表 1. 啮齿动物中 RNA 转染的推荐配比剂量
| 动物 | 注射方法 | 复合物配方 | RNA 最优范围 | 注射体积最优范围 |
| 小鼠 | 静脉注射 | 20 μgRNA+20 μL 转染试剂+葡萄糖溶液至 100 μL (葡萄糖溶液终浓度为 5%) | 20-60 μg(1-3mg/kg) | 100-300 μL |
| 腹腔内注射 | 100 μgRNA+100 μL 转染试剂+葡萄糖溶液至 0.4 mL(葡萄糖溶液终浓度为 5%) | 100-200 μg(4-8mg/kg) | < 1 mL | |
| 皮下注射 | 5 μg RNA+5 μL 转染试剂+葡萄糖溶液至 10 μL(葡萄糖溶液终浓度为 5%) | 3-5 μg | 5-15 μL | |
| 原位注射 | 5 μg RNA+5 μL 转染试剂+葡萄糖溶液至 10 μL(葡萄糖溶液终浓度为 5%) | 5-10 μg(0.25-0.5mg/kg) | 10-20 μL |
注：对于其他动物以及不同注射方式的体内转染配比剂量，可联系技术支持。
（3）使用说明
a. 用 10%葡萄糖溶液稀释 RNA 储备液（通常 RNA 储备液用无菌 DEPC 水配制），混匀。稀释后的RNA 溶液体积为最终所需注射体积的 1/2，葡萄糖溶液终浓度为 5%。
b. 用 10%葡萄糖溶液稀释siRNA/miRNA 体内转染试剂。所需siRNA/miRNA 体内转染试剂体积按照转染试剂与 RNA 体积质量比 1:1 计算。转染试剂稀释后体积为最终注射体积的 1/2，葡萄糖溶液终浓度为 5%，混匀。
c. 将稀释好的siRNA/miRNA 体内转染试剂加入稀释好的RNA 中，轻轻混匀。
d. 室温孵育 15 分钟，此时所形成的复合物可在室温下稳定存放 2 小时。
e. 在适当的时间（如，注射后 6-96 小时）监测基因表达，具体时间取决于注射方式和目标器官。
f. 以小鼠静脉注射途径给药为例说明复合物配制方式。如，实验注射剂量为25 μg RNA/只小鼠，RNA储备液浓度为 1 μg/μL；注射体积为 100 μL/只小鼠；RNA 与siRNA/miRNA 体内转染试剂的推荐使用比例为质量体积比 1:1 (w/v，1 μg RNA: 1 μL siRNA/miRNA 体内转染试剂)。因此，单只小鼠需配制如下溶液：
i. RNA 工作液，用的 10%葡萄糖溶液稀释 RNA 储备液；吸取 25 μL RNA 储备液，加入25 μL的10%葡糖糖溶液，混匀；
ii. siRNA/miRNA 体内转染试剂工作液，用 10%葡萄糖溶液稀释siRNA/miRNA 体内转染试剂；吸取 25 μL siRNA/miRNA 体内转染试剂，加入25μL 的 10%葡糖糖溶液，混匀。RNA 及siRNA/miRNA 体内转染试剂工作液配制好后，将siRNA/miRNA 体内转染试剂工作液加入 RNA 工作液中，轻轻混匀；室温孵育15分钟后，通过尾静脉进行注射。
其余给药方式的配制过程与本例相同（表 2）
| 注射方法（注射量） | 注射体积 | RNA 储备液（1 μg/μL） | 稀释 RNA 储备液的 10%葡萄糖溶液 | siRNA/miRNA体内转染试剂 | 稀释siRNA/miRNA体内转染试剂的10%葡萄糖溶液体积 |
| 静脉注射(25μg RNA/只) | 100 μL | 25 μL | 25 μL | 25 μL | 25 μL |
| 腹腔内注射(50μg RNA/只) | 200 μL | 50 μL | 50 μL | 50 μL | 50 μL |
| 皮下注射(5μg RNA/只) | 20 μL | 5 μL | 5 μL | 5 μL | 5 μL |
| 原位注射(10μg RNA/只) | 40 μL | 10 μL | 10 μL | 10 μL | 10 μL |
注：RNA 储备液浓度为 1 μg/μL
注意事项1. 使用高纯度的 RNA 是转染成功的关键因素，在转染前确定 RNA 的含量和纯度（OD260/280＞1.8），实验过程中使用 DEPC 处理过的耗材和试剂，避免 RNase 污染；另外RNA 制备时盐含量高会导致复合物形成时产生沉淀，因此应将 RNA 重悬于 5%葡萄糖溶液（由DEPC 水配制）或DEPC水中。
2. 体内转染所用 RNA 以及稀释液均为无菌制品，且操作步骤全程无菌。
3. 体内转染时按需现配现用。
4. 为了达到更好的转染效果，可根据实验需要优化 RNA 与siRNA/miRNA体内转染试剂(invivo)的配比，推荐优化比例范围为 1:1~1:4 (w/v, RNA: siRNA/miRNA 体内转染试剂)。
5. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
6. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
7. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
