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抗体蛋白
二抗生物素标记 过氧化物酶(HRP)标记 胶体金试剂 FITC荧光标记 RBITC荧光标记 二抗免疫血清 其它荧光标记二抗 藻红蛋白(PE)荧光标记 胶体金(Gold)标记 SAlexa Fluor荧光系列 碱性磷酸酶(AP)标记 别藻蓝蛋白(APC)荧光标记 其它标记 PE标记二抗 DyLight标记二抗 AU标记二抗 Biotin标记二抗 AMCA标记二抗 Texas Red标记二抗 TRITC标记二抗 HRP标记二抗 未标记二抗 Cy标记二抗 AbBox Fluor标记二抗内参抗体 小分子抗体抗体标记试剂盒细菌抗体蛋白病毒包装试剂杂交瘤融合筛选WB、IHC、ELISA相关试剂细胞培养试剂病原微生物抗原抗体假病毒抗体校准品其他抗原抗体标记的标签抗体病理级IHC抗体重组蛋白
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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称总一氧化氮合成酶(NOS)测试盒
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检测方法比色法
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保存温度按试剂盒各组分温度保存
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有效期6个月
产品简介检测前请仔细阅读说明书,预试后再进行批量实验
检测原理:NOS 催化 L-Arg 和分子氧反应生成 NO,NO 与亲核性物质生成有色化合物,在 530nm 波长下测定吸光度,根据吸光度的大小可计算出 NOS 活力。
产品组成| 试 剂 | 组分 | 25 管/24 样 | 50 管/48 样 | 保存温度 |
| 试剂一 | 底物缓冲液 | 6mL×1 瓶 | 6mL×2 瓶 - | -20℃ 避光 |
| 试剂二 | 促进剂 | 粉剂×2 支 | 粉剂×3 支 | -20℃ |
| 稀释液0.6 mL×2 支 | 稀释液0.6 mL×3 支 | -20℃ | ||
| (粉剂量较少,可能附着于管壁或盖子上,并非空管,如使用时肉眼不可见,可将其 4000 转/分钟离心 2 分钟后使用),测试前取稀释液一支 0.6mL 加入一支粉剂中充分混匀(即将 1.5mL 小离心管反复颠倒,并将小离心管尖部的液体弹下来),测试后剩余试剂可放入-20ºC 以下冷冻保存,时间不超过一周。若发现粉剂变成黄褐色或咖啡色,则不可以再用。 | ||||
| 试剂三 | 显色剂 | 3mL×1 瓶 | 6mL×1 瓶 | 2-8℃ 避光 |
| 试剂四 | 透明剂 | 3mL×1 瓶 | 6mL×1 瓶 | 室温 |
| 天冷后会凝固,37℃水浴变澄清时再使用 | ||||
| 试剂五 | 终止剂 | 60mL×1 瓶 | 60mL×2 瓶 | 2-8℃ |
| 从冰箱取出时可能会出现浑浊,37℃加热至透明再用 | ||||
操作步骤(仅供参考)自备试剂
含 530nm 波长的分光光度计及 1cm 光径比色皿、37℃恒温水浴锅或气浴箱、台式低速离心机、各种规格移液器、双蒸水、生理盐水(0.9%)或 PBS(0.1M)、涡旋混匀器、离心管、蛋白测定试剂(组织及细胞样本用)
操作步骤(仅供参考)
试剂从冰箱取出,室温稳定30分钟再用,试剂四和试剂五必须澄清透亮,再进行操作,否则会影响结果
| 空白管 | 总 NOS 测定管 | |
| 双蒸水(μL) | a* | |
| 样本(μL) | a* | |
| 试剂一底物缓冲液(μL) | 200 | 200 |
| 试剂二 促进剂(μL) | 10 | 10 |
| 试剂三 显色剂(μL) | 100 | 100 |
| 混匀,37ºC 水浴准确反应 15 分钟 | ||
| 试剂四 透明剂(μL) | 100 | 100 |
| 试剂五 终止液(μL) | 2000 | 2000 |
| 混匀,波长 530nm,1cm 光径,双蒸水调零,分光光度计测定各管吸光度值 | ||
注意:
1. a*为参考取样量及补足双蒸水的量,10%的大鼠肝组织 50~100μL,鼠血清 30μL,10%的大鼠肾匀浆50μL,狗血清 30μL,心肌培养液 100μL。
2. 比色时注意管内有无结晶或混浊,若有结晶或混浊可放 37℃水浴锅内轻轻搅动几下,混浊或结晶消失后再比色。
计算
(一)血清 T-NOS 酶活力计算
1. 样本前处理:直接使用。
2. 单位定义:每毫升血清每分钟催化生成 1nmol NO 为一个酶活力单位。
3. 计算公式:![]()
V反总: 反应液总体积,(a+2.41)mL;
V样: 取样量,(a)mL;
d: 比色光径,cm;
T: 反应时间,15min;
ε: 呈色物消光摩尔系数,38.3×10-6
(二)组织 T-NOS 酶活力计算
1. 样本前处理:准确称取待测组织的重量,按重量(g):体积(mL)=1:9 的比例加入 9 倍体积的匀浆介质(推荐0.9%的生理盐水或 0.1mol/L 且 pH 值为 7.0-7.4 的磷酸盐缓冲液),冰水浴条件机械匀浆,4000 转/分,离心10 分钟,取上清液(10%匀浆上清)待测。(注:匀浆上清需同步测定其蛋白浓度,蛋白测定试剂盒本所有售)
2. 单位定义:每毫克组织蛋白每分钟催化生成 1nmol NO为一个酶活力单位。
3. 计算公式:![]()
V反总: 反应液总体积,(a+2.41)mL;
V样: 取样量,(a)mL;d:比色光径,cm;
T: 反应时间,15min;
ε: 呈色物消光摩尔系数,38.3×10-6;
Cpr:组织匀浆蛋白浓度,mgprot/L(prot 指蛋白)
参考值
大鼠血清:18.69±3.97 U/mL(n=45)
10%大鼠肾匀浆:0.536±0.134 U/mgprot(n=19)
狗血清:20.57±3.39 U/mL(n=18)
心肌培养液:0.698±0.110U/mL(n=12)
注意事项1. 促进剂最好现用现配,配好后尽量一日内用完,如有剩余则-20ºC以下保存不超过一周;未配制之前的 2 号促进剂和稀释液均应-20ºC 以下保存,如淡黄色或白色粉末变成咖啡色或黄褐色颗粒则失效不可用。
2. NOS 活性低,稳定性差,样品或匀浆上清如不马上检测,应置-20ºC 以下冷冻保存。
3. 试剂一与配制好的试剂二应避免反复冻融。
4. 室温低时,试剂五会出现浑浊,如果已经在测试管中加入了 NOS 5 号,可将测试管对着灯光,观察有无结晶或浑浊。如果有结晶或浑浊,请将每只测试管 37ºC 水浴锅中晃动 5 分钟,再比色。
5. 检测范围:0.2-81.9U/mL。
6. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
8. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
9. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。



