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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)检测试剂盒(微量法)  Cite:0    分享

货号： FS0658
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规格:
100T/48S
单位:
盒
单价:￥1450.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤（仅供参考）
注意事项
基本信息
  • 产品名称
    土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)检测试剂盒
  • 检测方法
    微量法
  • 保存温度
    按试剂盒各组分温度保存
  • 有效期
    6个月
产品简介

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

■ 测定意义：S-NAG是溶酶体中的一种酸性水解酶，由土壤微生物分泌。S-NAG活性变化与机体某些病理状态密切相关。

■ 测定原理：S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。

产品组成

产品成分

100T/48S

Storage

试剂一：甲苯

5ml（自备）

4℃

试剂二：粉剂

1瓶

-20℃

试剂三：液体

20ml

4℃

试剂四：液体

15ml

4℃

说明书

一份

试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入10ml蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存。


操作步骤（仅供参考）

自备仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

样品处理

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。

测定步骤

1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。

2. 加样表：

试剂名称

测定管

对照管

风干土样（g）

0.02

0.02

试剂一（μl）

10

10


室温振荡混匀15min

90℃振荡混匀15min

试剂二（μl）

130


蒸馏水


130

试剂三（μl）

160

160

混匀， 37℃振荡反应1h后，90℃水浴5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却，

10000g 25℃离心10min，取上清液（在EP管或96孔板中加入下列试剂）；

上清液（μl）

70

70

试剂四（μl）

130

130

充分混匀，室温静置2min后， 400nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

S-NAG活力计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.00645x -0.0054；x为标准品浓度（μmol/L），y为吸光值。

单位的定义：每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-NAG活力（μmol/d/g 土样）＝ (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V反总÷W÷T =55.81×(ΔA+0.0054)

T：反应时间，1h=1/24d； V反总：反应体系总体积：3×10-4 L；W：样本质量，0.02g。

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0043x -0.0054；x为标准品浓度（μmol/L），y为吸光值。

单位的定义：每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-NAG活力（μmol/d/g 土样）＝ (ΔA+0.0054) ÷0.0043×V反总÷W÷T =83.72×(ΔA+0.0054)

T：反应时间，1h=1/24d； V反总：反应体系总体积：3×10-4 L；W：样本质量，0.02g。mol/mg prot

注意事项

1. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

3. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

4. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

 

备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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