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斑马鱼产品
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基本信息-
中文名称乙酰胆碱酯酶荧光检测试剂盒
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英文名称Acetylcholinesterase Fluorometric Assay Kit
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保存温度-20℃ 避光
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有效期6个月
产品简介■ 乙酰胆碱酯酶检测试剂盒提供基于荧光法对乙酰胆碱酯酶（AChE）活性进行连续检测的超灵敏方法。
■ 检测原理：乙酰胆碱酯酶将乙酰胆碱底物转化为胆碱，接着被胆碱氧化酶氧化后产生H2O2，H2O2在辣根过氧化物酶HRP作用下与荧光探针反应生成的产物在585nm处发出强烈的荧光。
■ 本试剂盒可检测低至0.002U/mL的AChE。本试剂盒可用于筛选AChE抑制剂等。
产品组成| 产品组分 | 规格 | 保存温度 |
| 试剂1: 反应Buffer | 30ml | -20℃ 避光 |
| 试剂2: 酶混合物 | 1管 | -20℃ 避光 |
| 试剂3: AChE阳性对照 | 1U | -20℃ 避光 |
试剂4: 底物乙酰胆碱 | 1管 | -20℃ 避光 |
试剂5: 荧光探针 | 1管 | -20℃ 避光 |
| 试剂6: H2O2 | 100ul | -20℃ 避光 |
操作步骤（仅供参考）1、试剂准备
1.1 配制荧光探针贮液：在1管荧光探针中加入200µL DMSO（用户自备）溶解成荧光探针贮液，-20°C，避光保存。
1.2 配制酶混合液：在1管酶混合物中加入220µL反应Buffer溶解。
1.3 配制底物乙酰胆碱溶液：将1管乙酰胆碱加入275µL dH2O，即用即配不得贮存。
1.4 配制阳性20 mM H2O2溶液：取23µL H2O2原液加入977µL dH2O，即用即配不得贮存。
2、检测乙酰胆碱酯酶的活性
2.1 配制ACHE阳性对照： 首先将1管 AChE阳性对照(1U )加入1000µL反应Buffer配成1U/mL，再用反应Buffer稀释5倍而配制成0.2 U/mL的阳性对照品, 另以反应Buffer作为阴性对照。
2.2 配制H2O₂阳性对照：将20 mM H2O₂工作液用反应Buffer稀释至10µM。
2.3 将样本（或稀释的样本）和对照品各100µL加入微孔板的各孔中。
2.4 配制10mL染色工作液（可用于~100次检测）：取9.59 mL反应Buffer、200µL荧光试剂贮液、200µL酶混合液和10µL底物乙酰胆碱溶液混合，配制成染色工作液。
2.5 在样品孔、对照品孔、标准液孔中各加入100µL的染色工作液。
2.6 室温避光孵育30分钟或更长时间。
由于该检测为连续反应，可通过在多个时间点测量荧光强度来追踪反应动力学。
2.7 荧光酶标仪检测，激发波长为530-560 nm，发射波长~590 nm。
2.8 对于每个点，通过减去无AChE阳性对照所得的数值，校正背景荧光。
注意事项1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
