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GUS染色试剂盒(即用型)  Cite:97    分享
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货号: S51519
复制产品信息
  • 用途:用于转基因植物的GUS基因表达的简易检测
规格:
50ml 100ml
单位:
单价:¥650.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤(仅供参考)
注意事项
基本信息
  • 中文名称
    GUS染色试剂盒(即用型)
  • 保存温度
    -20℃ 避光
  • 有效期
    1年
  • 应用
    用于转基因植物的GUS基因表达的简易检测。
产品简介

GUS(β-Galactosidase)基因是存在于 E.coli 等一些细菌基因组内的编码β-葡萄糖苷酸酶的一种水解酶,该基因常作为融合标记用于植物转基因分析和调控研究中。GUS 受体基因系统有表达 E.coli GUS 酶的稳定性和在植物内的低活性,绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性,以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物,其反应产物可用多种方法检测出来。5-Bromo-chloro-3-indolyl β -D-glucuronide , cyclohexylammoniumsalt( 简称为X-Gluc 或 X-GlcA)分子量为 521.8,CAS 号为 18656-96-7,是检测大肠杆菌中GUS基因的底物,可快速检测植物中 GUS 基因融合标记。
本品GUS染色液(即用型)又称β-葡萄糖苷酶基因染色试剂盒(β-GalactosidaseReporter Gene Staining Kit)简称为GUS 染色液,其染色原理是适宜的反应条件下β-葡萄糖苷酶(GUS)可将 X-Gluc 水解成蓝色物质,该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质,具有 GUS 活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点,可用肉眼或显微镜观察到,GUS染色液可用于生物化学活性分析、免疫分析以及组织和细胞的组织化学染色,多用于转基因植物的 GUS 基因表达分析,该即用型试剂比常规 GUS 染色液操作简便。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途

产品组成
名称50ml100ml保温
    试剂(A): X-Gluc1支2支-20℃ 避光
    试剂(B): X-Gluc Solution1ml2x1ml室温 避光
    试剂(C): GUS Buffer50ml100ml4℃ 避光


操作步骤(仅供参考)

自备材料
1. 70%乙醇、去离子水
2. 小瓶或多孔板、显微镜
操作步骤(仅供参考)
1. 配制 X-Gluc 溶液(50x):取 1ml X-Gluc Solution 完全加至 1 支X-Gluc 中,充分溶解, 即获得 X-Gluc 溶液(50x)。配制好的 X-Gluc 溶液(50x)-20℃保存,1 个月有效。
2. 配制 X-Gluc 染色液:取适量的 X-Gluc 溶液(50x)和 GUS Buffer,按1:49 比例充分混匀,配制成 X-Gluc 染色液,如取 0.2ml X-Gluc 溶液(50x)加入到 9.8ml GUS Buffer 中,即配成 10ml GUS 染色液,该染色液最好现用现配,短期贮存可以 4℃保存3 天。

3. 取适量待染叶片等组织加入适量 GUS 染色液使其完全浸没组织。
4. 37℃孵育 1~24h,随着孵育时间的延长,蓝色渐渐出现,当表达量较高时GUS 活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点。
5. 用 70%乙醇脱去样本的叶绿素,一般样本浸没于乙醇 1~3h,至阴性对照呈白色。如有必要可重复该脱色步骤,以便彻底清除叶绿素;样本保存于乙醇中,可用肉眼或普通光学显微镜下观察,白色背景上的蓝色即为 GUS 表达位点。

注意事项

1. GUS染色液最好冰上配制,现配现用。配制后用不完可-20℃避光保存,如果溶液由无色变为红色或紫红色应弃用。
2. 由于组织特异性等原因,蓝色颜色反应可能不完全一致,应注意摸索具体实验条件。
3. 拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗根就可直接染色;烟草和马铃薯这些植物的茎和叶须在染色前切成薄片(1~3mm)。
4. 当操作大的组织和样品时可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞,建议采购常规GUS染色液。
5. GUS染色液(即用型)染色灵敏度较好,但有时会出现非特异性反应(即假阳性),如非特异性反应较明显,建议采购常规GUS染色液。
6. 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

8. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

9. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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