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植物超氧阴离子染色液(NBT,PH7.8)  Cite:0    分享

货号： F13986
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  • 用途：于对植物样品中积累的超氧阴离子进行定位染色，可反映出植物对逆境胁迫的反应程度。超氧阴离子能将NBT(氮蓝四唑)还原成不溶于水的蓝色化合物，从而定位组织中的超氧阴离子
规格:
3×100ML
单位:
盒
单价:￥450.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤（仅供参考）
注意事项
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基本信息
  • 中文名称
    植物超氧阴离子染色液(NBT,PH7.8)
  • 保存温度
    2-8℃ 避光
  • 有效期
    1年
  • 应用
    用于对植物样品中积累的超氧阴离子进行定位染色，可反映出植物对逆境胁迫的反应程度。超氧阴离子能将NBT(氮蓝四唑)还原成不溶于水的蓝色化合物，从而定位组织中的超氧阴离子
产品简介

■ 植物组织在胁迫环境条件下会产生多种活性氧（ROS），ROS活性非常大且极其不稳定，因此ROS的检测通常因其最终产物而定。超氧阴离子是活性氧的一种，属于一种含氧自由基，能将NBT（氮蓝四唑）还原成不溶于水的蓝色甲瓒化合物，从而定位组织中的超氧阴离子。
■ 本品植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.8)根据上述基本原理也称为NBT染色法，用于植物活组织中的超氧阴离子染色。一般应用于较嫩的根尖、叶片等的整体染色，染色后有超氧阴离子聚集的部位呈蓝色至深蓝色。

产品组成
组分3×100ml保存温度
     试剂(A)：NBT50mg2-8℃ 避光
     试剂(B)：磷酸缓冲液(pH7.8)100ml室温
     试剂(C)：NBT样本保存液2x100ml室温


操作步骤（仅供参考）

自备材料
1. 新鲜的植物叶片或根、自来水、蒸馏水、95%乙醇
2. 超声波、磁力搅拌器、电子天平、滤纸、照相机
操作步骤(仅供参考)
1. 试剂准备：将 50 mg NBT 加入到 100mL 磷酸缓冲液(pH7.8) 中充分溶解，即得NBT染色工作液，4℃避光保存，一月内有效。注：如果较难溶解，可通过超声、磁力搅拌等方法促溶。
2. 样本准备：采集经胁迫（例如重金属）的采集植物幼苗或根尖，自来水稍洗净，置于滤纸上吸干多余水分。
3. 染色：将植物幼苗或根尖浸入 NBT 染色工作液中，常温避光浸染2~6 h，至阳性部位出现深蓝色，其余部位为淡蓝色或近无色或呈植物本身的颜色即可。（根据植物幼嫩程度。显色程度调整染色时间）
4. 脱色：用镊子将植物幼苗或者叶片小心取出，浸入蒸馏水中来回漂洗3~5 次，置于滤纸上吸干多余水分后，浸入 95%乙醇中 40℃处理 3~16 h，目的是脱去植株幼苗或者叶片本身的叶绿素或者淡蓝色背景，处理期间可多次更换新鲜的 95%乙醇。
5. 观察：用镊子取出植株幼苗或者叶片，浸入蒸馏水中来回漂洗 3~5 次，置于滤纸上吸干多余水分后，将样本转入适量 NBT 样本保存液中浸泡 30 min 后，随后可取出拍照。样本可置于该溶液中常温保存一周。

注意事项

1. NBT染色工作液配制好以后需 4℃避光保存，一月内使用。存放时间过久，会影响显色。
2. 因任何外在因素都可能刺激植物应激产生超氧阴离子，因此植物样本需要新鲜采集，并尽快完成染色。建议做阴性及阳性空白对照组。
3. 样本染色完成后尽快拍照保存结果。
4. 染色和脱色步骤也可参考如下建议操作：组织放入染液中，抽真空，-0.1MPa保持负压20~30min，再于室温下静置染色60min，弃染色液；加入95%乙醇，于70~80℃水浴锅脱色，每隔10min 换一次95%乙醇，待样品绿色全部褪去后可停止脱色。
5. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
6. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
7. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准

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