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磺酰罗丹明B(SRB)细胞增殖及毒性检测试剂盒  Cite:12    分享
SRB Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

货号: C11199
复制产品信息
规格:
100T 500T
单位:
单价:¥397.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤(仅供参考)
注意事项
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基本信息
  • 中文名称
    磺酰罗丹明B(SRB)细胞增殖及毒性检测试剂盒
  • 保存温度
    2-8℃
  • 有效期
    1年
产品简介

磺酰罗丹明 B(Sulforhodamine B,SRB)比色法,主要用来检测细胞增殖情况。SRB 是一种粉红色阴离子染料,易溶于水,在酸性条件下可特异性地与细胞内组成蛋白质的碱性氨基酸结合;在 515 nm 波长下产生吸收峰,吸光值与细胞量成线性正相关,故可用作细胞数的定量检测。
SRB 染色后不会像 MTT 法那样很容易变色,细胞固定染色后在 96 孔板中可以放置较长时间,因而受测定时间的影响较小。用 Tris 溶液溶解的 SRB 也可稳定较长时间。因此不同时间点固定的 96 孔细胞培养板可在同一时间测定,测定的吸光值结果不会受到明显影响。吸光值与 SRB 浓度作图时,在 OD 单位 1.5-2.0 以下为线性,当超出线形范围时,最好稀释后重新读数。虽然 SRB 法比其他检测方法操作步骤繁琐,但是由于时间可以自己掌握,不受限制,因此适用于高通量筛选。

产品组成
组分100T500T保存温度
                  固定液 10ml50ml2-8℃ 避光
                  洗涤液 1 60ml300ml2-8℃
                  染色液10ml50ml2-8℃ 避光
                  洗涤液 2 100ml500ml2-8℃
                  溶解液 20ml100ml2-8℃


操作步骤(仅供参考)

1. 收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,分于 96 孔板,每孔 100μL。
2. 置 37℃、5% CO2 温箱培养使细胞贴壁,培养 6-24 小时。
3. 取出细胞,弃掉培养基,PBS 清洗 1-2 次。
4. 加入 100μL 预冷的固定液,室温静止 5 min,然后 4℃静止 1h。
5. 弃掉上清,用洗涤液 1 清洗三次,室温干燥。
6. 加入 100μL 染色液,避光孵育 20 min(可用铝箔包裹后置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动),弃掉染色液。
7. 用洗涤液 2 清洗五次(快速完成,以免染色液漏出细胞外),尽量清洗掉残留染色液,室温干燥。
8. 加入 200μL 溶解液,避光孵育 30 min(可用铝箔包裹后置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动)。
9. 测其 515nm 波长处吸光值。

注意事项

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,确定最佳的细胞用量,取得最佳实验效果。
2. 由于使用 96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。可以采取弃用周围一圈的办法,改加 PBS,水或培养液;也可以把 96 孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
3. 接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一下。

4. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
5. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

6. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

7. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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