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基本信息-
产品名称MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
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保存温度-20℃ 表格
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有效期1年
产品简介MTT 比色法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（MTT Cell ProliferationandCytotoxicity Assay）被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT 检测原理在于活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色 Formazan 并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。在特定溶剂(如DMSO)存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定 570nm 波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。
产品组成| 组分 | 500T | 1000T |
| MTT 溶液 | 5ml | 5ml×2 |
| Formazan 溶解液 | 60ml | 60ml×2 |
操作步骤（仅供参考）1. 细胞用含血清的培养液培养至对数生长期，常规胰蛋白酶消化液消化细胞（悬浮细胞无需消化）。
2. 低速离心，收集细胞沉淀。
3. 用培养液重悬细胞沉淀，制备成单细胞悬液，并计数。
4. 细胞接种于 96 孔培养板，一般接种密度为 3000-10000 个/孔。通常细胞增殖实验每孔加 3000 个细胞，细胞毒性实验每孔加 6000 个细胞即可。具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定。
5. 37℃ 5% CO2 继续培养或按照实验具体需要进行培养，一般培养 6-24h。
6. 按照实验具体要求，给予 0-20μL 干预药物处理，37℃ 5% CO2 继续培养至合适时间。
7. 弃培养液，每孔加入 10μL MTT 溶液和 90μL 新鲜培养液，在细胞培养箱内继续孵育 4h。
8. 弃培养液，每孔加入 110μL DMSO，置摇床上低速震荡 10min，使结晶物充分溶解。如果紫色结晶较小或较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大或较多，溶解的时间会长一些。
9. 在酶标仪 570nm 测定各孔吸光度。
注意事项1. 由于使用 96 孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于96 孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加 PBS，水或培养液；另一方面，可以把 96 孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
2. MTT 溶液为黄色需避光保存，长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时，请勿使用。
3. MTT 溶液在低温情况下会凝固，使用前请置于室温或 20-25℃水浴至全部融解后使用。
4. Formazan 溶解液结冻或产生沉淀时可以 37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。
5. MTT 溶液在低温情况下会凝固，使用前请置于室温或 20-25℃水浴至全部融解后使用。
6. 培养细胞时尽量避免细菌污染。应注意设立 OD 调零孔和对照。
7. 含酚红的培养基和盐溶液会使背景的吸光值增高，同时也会降低灵敏度。
8. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
9. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
10. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
11. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
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