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Fluo-4 AM 钙离子荧光探针(2mM)  Cite:0    分享
Fluo-4 AM

货号： S26003
复制产品信息
规格:
25ul
单位:
支
单价:￥839.00
基本信息
产品简介
使用说明
注意事项
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基本信息
  • 中文名称
    Fluo-4 AM 钙离子荧光探针(2mM)
  • 英文名称
    Fluo-4 AM
  • 保存温度
    -20℃ 避光
  • 有效期
    6个月
  • 应用
    最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一
产品简介

1. Fluo-4 AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。分子式为C51H50F2N2O23，分子量为1096.95。
2. Fluo-4 AM在Fluo-3 AM的基础上改进而成，其特点是加载更快并且在相同条件下荧光更加明亮。Fluo-4 AM将Fluo-3 AM结构中的氯原子替换成了氟原子，导致它的最大激发波长会向短波长处偏离12nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长488nm，所以用氩激光器激发时，Fluo-4的荧光强度会比Fluo-3强一倍。由于Fluo-4与钙离子的亲和力和Fluo-3相近，所以使用上和Fluo-3也基本相同，可以使用激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪等荧光检测仪器来测定细胞内钙离子浓度的变化。
3. Fluo-4 AM是Fluo-4的乙酰甲酯衍生物，是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-4 AM的荧光非常弱，其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。Fluo-4 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4，从而被滞留在细胞内。Fluo-4可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光，最大激发波长为494nm，最大发射波长为516nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为512-520nm。
4. 用于细胞内钙离子检测时，Fluo-4 AM的常用浓度为0.5-5µM。通常用含有0.5-5µM的Fluo-4 AM的适当溶液和细胞一起在20-37ºC孵育10-60分钟进行荧光探针装载，随后适当洗涤，洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-4 AM在细胞内充分转变成Fluo-4。
5. 本Fluo-4 AM(钙离子荧光探针) 是配制于无水DMSO (anhydrous DMSO)中的储存母液，浓度为2mM。

使用说明

1. 取适量Fluo-4 AM母液，用PBS稀释至0.5-5µM的工作液。注：工作液须即用即配，请勿反复冻融。
2. 对于待检测的培养细胞，去除培养液，用PBS或HBSS洗三遍。注：因为培养液中的血清含有酯酶会导致Fluo-4 AM分解为Fluo-4，而酚红会导致荧光背景增强。
3. 加入Fluo-4 AM工作液，溶液量以能充分覆盖细胞为准。
4. 20ºC-37ºC孵育10-60分钟进行荧光探针装载。注：如果是首次实验不能确定孵育温度和时间，建议先尝试37ºC孵育30分钟，观察荧光效果。如果细胞死亡较多，则适当缩短时间或降低温度；如果荧光强度太弱，则适当延长时间。
5. 随后用PBS或HBSS洗涤3次，洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-4 AM在细胞内完全转变成Fluo-4。
6. 如有需要，可以使用适当药物来刺激细胞。
7. 用激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪、荧光分光光度计或流式细胞仪等荧光检测仪器检测Fluo-4的荧光，以确定细胞内钙离子浓度的变化。

注意事项

1. Fluo-4 AM遇水极易分解，建议第一次使用时，母液分装并密封保存，同时注意保持干燥。
2. Fluo-4 AM在4ºC、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25ºC水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 探针的工作浓度、细胞量、孵育温度和时间等需要根据不同实验预先摸索。
4. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
5. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。 

6. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 

7. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。 


备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。

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