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斑马鱼产品
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产品简介■ 萨默斯Summus® 细胞内质网钙离子检测试剂盒采用Summus® C93细胞内质网钙离子浓度荧光探针检测内质网钙离子浓度水平的变化。
■ 萨默斯Summus® C93 具有极高的细胞渗透性,经过简单孵育即可实现细胞加载。穿透细胞膜进
入细胞后会特异性进入内质网。C93游离配体几乎是非荧光性的,其荧光不会随钙离子浓度
升高而增强。但是,当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,荧光会增加60至100
倍,最大激发波长为 556 nm,最大发射波长为 580 nm。可以使用荧光显微镜、酶标仪、激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内质网钙离子浓度的变化。
■ 萨默斯Summus® C93 荧光探针采用可见光激发,与传统的紫外光激发的荧光探针相比,仪器的适用范围更广泛,具有更强的探针吸收性能,使得更低浓度的探针即可成功检测Ca2+变化,从而降低了对活细胞的光毒性,检测敏感度更高。
■ 钙离子浓度变化是活细胞接受外界刺激后产生级联反应的重要信息传递方式,因此细胞内钙离子检测是信号转导G蛋白偶联受体(GPCR)介导的相关药物筛选以及其他相关实验中非常重要的一种研究手段。
■ 适用样本:1. 悬浮细胞 2. 贴壁细胞
产品组成| 组分 | 50T | 100T | 保存温度 |
| Summus® C93 内质网钙离子染色液 | 25 μl | 50 μl | -20℃ 避光 |
【注】
1. 探针染料短期2周内可以2-8℃保存。探针长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2. 探针染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3. 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4. 试剂拆封后请尽快使用完!
操作步骤(仅供参考)自备材料
荧光酶标仪/分光光度计/激光共聚焦/流式细胞仪/荧光显微镜等,离心机,移液器,冰箱,冰盒,离心管,吸头,一次性手套,荧光专用黑色96孔板,PBS缓冲液或HBSS
操作步骤(仅供参考)
1. 染色工作液的配制:用 HBSS 稀释 Summus® C93溶液1000倍,配制成Summus® C93染色工作液。
2. 收集培养好的待测细胞样本,用HBSS洗涤细胞3次。
3. 离心去上清后,将 Summus® C93染色工作液加入细胞,在37℃孵育30 -120分钟。
4. 用HBSS洗涤细胞2-3次。
5. 用HBSS重悬细胞。在37℃下再继续孵育20-40分钟。
6. 然后用该细胞进行荧光钙离子检测。
激发波长 565 nm,发射波长580 nm。
钙离子浓度增高,荧光增强。
使用注意事项
1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 钙离子染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3. 探针为了便于观察防止误操作导致损失,在试剂盒中时是采用透明管包装,收到后可以离心移入干燥黑色避光密封管或者用铝箔包裹避光。
4. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
5. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
6. 染色后立即进行分析。
7. Summus® C93探针容易受潮,稳定性较差,注意干燥保存。从冰箱取出后,请确认在干燥的环境放至室温后再开封。
8. Summus® C93探针母液时要用干燥的新吸头,不能使用含水的吸头。
9. 未使用完的Summus® C93探针母液请拧紧螺旋盖,避免受潮失效。母液遇水极易分解,如果长期不用,建议根据每次使用量分装保存,用封口膜封口,并用铝箔纸包裹,放在一个密闭性能好的塑料袋中,并放入一包干燥剂,在≤-20℃密封避光保存。
10. Summus® C93探针工作液含水,配制后不可以长期保存,须现配现用。
11. Summus® C93融解后离心至管底部再打开螺旋盖,防止开盖时损失。
12. 可以在染色工作溶液中加入20% Pluronic F127溶液(可选步骤),Pluronic F127 可以帮助Summus® C93更快进入细胞,不建议在Pluronic F127中长期保存Summus® C93溶液。
13. 标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先确定最佳条件。在正式实验前先摸索一下细胞量、钙离子荧光探针的终浓度、培养时间等,找到最佳实验条件。
储存与保存1.试剂盒保存:-20℃ 避光
2.有效期:6个月
注意事项1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,
避免开盖时试剂损失。
3. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
4. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
5. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
6. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
7. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
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