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斑马鱼产品
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基本信息-
中文名称Fluo-3 AM 钙离子荧光探针(5mM)
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英文名称Fluo-3 AM
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保存温度-20℃ 避光
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有效期6个月
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应用最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一
产品简介Fluo-3 AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-3，从而被滞留在细胞内，Fluo-3若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，最大激发波长为506nm，最大发射波长为526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为525～530nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。
本品Fluo-3 AM 钙离子荧光探针是配制于无水DMSO (anhydrous DMSO)中的储存液，浓度为5mM。
操作步骤（仅供参考）1. 试剂
5mM 的 Fluo-3 AM/DMSO
Pluronic F127
Hanks•balanced salt solution(HBSS)
HEPES buffer saline(10mM HEPES,1mM Na2HPO4,137mM NaCl,5mM KCl,1mM CaCl2,0.5mM MgCl2,5mM glucose，0.1% BSA,pH 7.4)
2. 操作
①向Fluo-3 AM/DMSO溶液中加入16.5mg Pluronic F127，Pluronic F127可以防止 Fluo-3 AM在HBSS 中聚合并能帮助其进入细胞。
②用HBSS稀释Fluo-3 AM溶液，制备4-5µM的Fluo-3 AM 工作液。
③将Fluo-3 AM工作液加入细胞，在37℃培养20分钟。
④加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS，再继续培养40分钟。
⑤用HEPES buffer saline 洗涤细胞3次，然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮，制成1×105cells/mL的溶液。
⑥37℃下培养10分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长506nm，发射波长526nm。
*标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。
注意事项1. 本Fluo-3 AM在4ºC、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25ºC水浴温育片刻至全部融解后使用。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
4. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
5. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
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