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基本信息-
中文名称Fluo-3 AM 钙离子浓度检测试剂盒
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规格200T（以 96 孔板为例）
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有效期1年
产品简介Fluo-3 AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-3 ，从而被滞留在细胞内，Fluo-3若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，最大激发波长为506nm ，最大发射波长为526nm 。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为525～530nm 。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。
产品组成| 组分 | 规格 | 保存温度 |
| 5mM Fluo-3, AM | 20μL | -20℃ 避光 |
| 20% Pluronic F127 | 20μL | 室温 避光 |
| HBSS | 75 mL×2 | 4℃ |
| HEPES buffer saline | 100mL | 4℃ |
操作步骤（仅供参考）注：20% Pluronic F127在 2-8℃条件下保存较为粘稠易固化，不好吸取。建议37℃水浴5-10min完全融化后。在室温下 1000g离心1-5min后可正常取用。
1. 向Fluo AM/DMSO溶液中加入等体积的20%的 Pluronic F127溶液，Pluronic F127可以防止Fluo-3 AM在 HBSS中聚合并能够帮助其进入细胞。注意：不建议在Pluronic F127中长期保存Fluo-3 AM溶液。Pluronic F127 的量可以适当调整。Pluronic F127和Fluo-3 AM一定要确保完全溶解后才可使用。
2. 用HBSS 稀释Fluo-3 AM溶液，制备4-5µM的Fluo-3 AM工作液。注意：为了避免过度加载造成细胞毒性，建议在取得有效结果的基础上尽量使用最低探针浓度。
3. 将Fluo-3 AM工作液加入细胞，在37℃培养20分钟。
4. 加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS，再继续培养40分钟。
5. 用HEPES buffer saline洗涤细胞3次，然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮，制成1×105cells/mL的溶液。
6. 37℃下培养10分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长506nm，发射波长526nm。
*标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。
注意事项1. 如果使用含有血清的培养基，血清中的脂酶会分解AM体，从而降低Fluo-3 AM进入细胞的效果。另外，含有酚红的培养基会使本底值略微偏高，所以加工作液之前，应该尽量去除培养基残留。
2. 荧光染料均存在萃灭问题，请注意避光，以减缓荧光萃灭。
3. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
4. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
5. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
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